Question

【題目】某研究團隊擬從餐廚垃圾中分離具有高效降解能力的微生物，并制成菌制劑，用于餐廚垃圾高效無害化處理。設計實驗如下：

步驟一：取一定量的餐廚垃圾樣品，篩除大塊雜質后，裝入無菌袋中密封，備用。

步驟二：配制用于培養菌種的培養基，配方如下：

成分	蛋白胨	牛肉膏	氯化鈉	瓊脂
含量（g/L）	10	15	10	5

【1】根據配方可知，該培養基屬于

A.固體培養基B.液體培養基

C.通用培養基D.選擇培養基

步驟三：制備樣品稀釋液，并將不同濃度的樣品稀釋液涂布于平板培養基表面進行培養，48h后觀察結果。

【2】在涂布過程中需要用到的工具有

A.無菌圓紙片B.無菌玻璃刮鏟C.酒精燈D.接種環E.無菌滴管

【3】培養后，培養基上長出了35個菌落，通過觀察菌落的____________，可初步判斷是20種不同的菌種。為進一步確定菌種類型，還需從分子水平進行的檢測方法是_____________。

步驟四：對20種菌種進行分離純化。為了比較這些菌種對餐廚垃圾的降解效果，分別配制含有餐廚垃圾主要成分（淀粉、蛋白質、脂肪和纖維素）的培養基，分別用于測定各菌種對其主要成分的降解效果，并進行測定。圖表示其中4種菌種（X1-X4）在淀粉培養基上的培養結果，表3為這四種菌的測定結果。

四種菌種對餐廚垃圾各成分的降解系數

菌種 編號	淀粉 （D/D0）	蛋白質 （D/D0）	脂肪 （D/D0）	纖維素 （D/D0）
X1	2.26±0.20	2.26±0.08	1.06±0.05	1.17±0.05
X2	1.90±0.08	1.90±0.08	1.10±0.09	1.05±0.11
X3	1.78±0.05	1.78±0.19	1.20±0.11	3.13±0.26
X4	2.09±0.07	2.09±0.08	2.10±0.02	2.39±0.14

備注：降解系數（D/D0）越大，降解效果越明顯。

【4】寫出圖所示的測定菌種對淀粉降解效果的實驗原理：_______________。

【5】根據表中數據判斷，降解餐廚垃圾能力最強的菌種是______________。

Answer 1

【答案】

【1】AC

【2】BCE

【3】 形態 基因檢測

【4】菌種對淀粉降解的能力越強，分解培養基中的淀粉就越多，培養基上形成的透明圈就越大，即D/D0比值越大

【5】X4

【解析】

據表表一中，該培養基的配方中有瓊脂，所以該培養基為固體培養基，培養基中的碳源、氮源、無機鹽成分齊全，故為通用培養基的配方。圖中和表二中，X4菌落的D/D0最大，降解餐廚垃圾效果最好。

【1】據表一分析可知，該培養基的配方中有瓊脂，所以該培養基為固體培養基，培養基中的碳源、氮源、無機鹽成分齊全，故為通用培養基的配方，故選AC。

【2】在稀釋涂布平板法接種過程中，需要使用在酒精燈火焰附近操作，用無菌玻璃刮鏟涂布接種，用無菌滴管移取菌液，故選BCE。

【3】培養后，培養基上長出菌落，需要觀察菌落的形態特征初步判斷菌種的的種類。要進一步確定菌種類型，還需從分子水平進行基因檢測。

【4】根據題意和題圖分析可知，菌種對淀粉降解的能力越強，分解培養基中的淀粉就越多，培養基上形成的透明圈就越大，即D/D0比值越大。

【5】根據表二綜合分析可知，餐廚垃圾以脂肪和纖維素類為主，所以四種菌種對四種餐廚垃圾的D/D0比值相對較大的是X4。

本題結合圖表主要課程微生物的培養與分離，意在強化學生對微生物培養與分離的相關原理及應用的相關知識的理解與掌握。