Question

【題目】（一種廣泛使用的除草劑（含氮有機物）在土壤中不易被降解，長期使用可污染土壤。為修復被該除草劑污染的土壤，可用一定方法選育能降解該除草劑的細菌（己知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養基不透明）。

（1）現有一升土壤浸出液，為了對土壤中的細菌進行計數，各取0．1mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三個培養基上培養。接種需選擇上圖工具中的__________進行實驗操作。計數結束記錄上述三個培養皿中的菌落數分別為55、56、57，則每升原土壤浸出液中菌體數為__________。

（2）在培養基上形成的菌落中，有透明圈菌落利用的氮源主要是__________，據此可篩選出目的菌。實驗結果如右上圖顯示的A～E五種菌株中，__________是最理想菌株，判斷依據是__________。

（3）在無菌操作下，將最理想的單菌落用接種環取出，再用________法接種在斜面上，37℃培養24h后，置于________（填具體的溫度）冰箱中保存。

Answer 1

【答案】B 5.6×108 該除草劑 E 降解圈直徑與菌落直徑比值最大 劃線 4℃

【解析】

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。
對于頻繁使用的菌種，常用臨時保藏法；對于需要長期保存的菌種，常用甘油管藏法。

（1）常用稀釋涂布平板法對土壤中細菌進行計數，涂布平板法要用B涂布器進行操作。每升土壤浸出液中菌體數為（55+56+57）÷3×103×104=5.6×108個。
（2）要篩選抗除草劑的菌體，培養基中應該以該除草劑作為唯一氮源。圖中E菌株降解圈直徑與菌落直徑比值最大，故是最理想的菌株。
（3）菌種保藏時，可將單菌落取出用劃線法接種在斜面上，適宜的溫度下培養后，再放入4℃的冰箱中保存。