Question

【題目】桑椹釀酒使用的多為葡萄酒酵母菌�，F科研人員從桑園中分離出發酵性能優良的專用桑樵酒酵母菌E44，并用葡萄酒酵母菌（CK）做對照，對其相關性能進行測定。分析回答下列問題：

（1）分離E44菌株的培養基一般需用______________滅菌，常用的分離方法是平板劃線法和______________。研究發現，釀酒酵母菌不能以賴氨酸作為氮源，因此可將分離獲得的酵母菌接種在____________________________的培養基上進行鑒定，結果發現菌株不能生長。

（2）普遍認為酵母菌的發酵能力與菌株對酒精的耐受性有關。為此，科研人員對E44菌株和CK菌株在不同酒精濃度下的死亡率進行了測定，由實驗結果判斷E44菌株的酒精耐受性更高，該結果的檢測過程中先用次甲基藍染色，再借助顯微鏡運用______________法計數后，計算出各菌株的死亡率。次甲基藍可將死細胞染成藍色，而活細胞不著色，原因是____________________________。

（3）為進一步確定E44菌株的發酵性能，科研人員分別測定并繪制了E44菌株和CK菌株的發酵性能曲線（如下圖）。由圖可知，第1d酵母菌降糖速率緩慢，酒精度增長較慢的原因是______________________。從第2d開始，糖度迅速下降，酒精度也較快增長的原因是____________________________。通過對比發現，E44菌株比CK菌株起酵快，發酵平穩，是優良的桑棋酒釀酒酵母菌種。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌法 稀釋涂布平板法 以賴氨酸為唯一氮源 血細胞計數板（或顯微鏡直接計數） 細胞死亡，細胞膜不能控制物質進出（或失去選擇透過性） 酵母正處于增殖階段，以有氧呼吸為主，產生酒精較少 酵母菌進行無氧呼吸產生大量酒精

【解析】

分析題圖可知，第一天酵母菌降糖緩慢，酒精度增長較慢，說明此時酵母菌正處于大量增殖階段，以有氧呼吸為主，產生酒精較少。從第二天開始糖度迅速下降，酒精度也較快增長，進入發酵階段，進行無氧呼吸，產生大量酒精。第五天之后糖度和酒精度趨緩，進入后發酵階段。

（1）培養微生物的培養基一般需要用高壓蒸汽滅菌法滅菌；常用的分離方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；釀酒酵母不能以賴氨酸作為氮源，因此，可以將分離獲得的酵母菌接種在以賴氨酸為唯一氮源的培養基上進行鑒定，結果發現釀酒酵母不能生長；

（2）統計細胞數量用血細胞計數板；活細胞的細胞膜具有選擇透過性，用次甲基藍不能對活細胞染色，而能使死細胞染成藍色；

（3）從圖中可以看出，第1 d酵母菌降糖緩慢，酒精度增長較慢，說明此時酵母菌正處于大量增殖階段，以有氧呼吸為主，產生酒精較少；從第2 d開始糖度迅速下降，酒精度也較快增長，進入發酵階段，進行無氧呼吸，產生大量酒精。