Question

【題目】為了研究手機屏幕上的細菌數量和種類，有人做了下圖所示的實驗。回答下列問題：

(1)該實驗需制備固體培養基，制備固體培養基的操作順序是：計算一稱量一____一____ 一倒平板。為了防止培養基被雜菌污染，倒平板時應該注意： ___（寫出兩點）。

(2)該實驗在平板培養基上的接種方法是 ___法。培養一段時間后，通過觀察菌落的____等特征（寫出兩點），可知手機上存在多種微生物。

(3)若按圖中方法取樣，測定某手機屏幕上的細菌數量，從10 mL菌懸液中取出1 mL，稀釋100倍，在3個平板上分別接入0.1 mL稀釋液，經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為38、40和42，則該手機屏幕的細菌數為 ___個/cm2。該方法計數的結果往往比實際結果偏 ___（填“高”或“低”），原因是___ 。

Answer 1

【答案】溶化 滅菌 裝有培養基的錐形瓶口經火焰灼燒、培養基從培養皿和皿蓋之間的縫隙倒入、平板冷卻凝固后倒置 涂布平板 形態、大小、顏色、隆起程度 1.6×104 低 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

【解析】

1、微生物培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。對異養微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養要素成分時并不是起單一方面的作用。
2、兩種純化細菌的方法的比較：

	優點	缺點	適用范圍
平板劃線分離法	可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離	不能計數	適用于好氧菌
稀釋涂布平板法	可以計數，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧，兼性

（1）制備牛肉膏蛋白胨固體培養基其基本過程為計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板五個步驟，為了防止培養基被雜菌污染，倒平板時應該注意裝有培養基的錐形瓶口經火焰灼燒、培養基從培養皿和皿蓋之間的縫隙倒入、平板冷卻凝固后倒置。

（2）由圖中3組培養結果可知，該實驗接種微生物的方法為稀釋涂布平板法，由于不同菌落的形態特征不同，故可根據觀察菌落的形態、大小、顏色、隆起程度等，可知手機上存在多種微生物。

（3）統計菌落數分別為38、40、42，一個方格的面積為5cm×5cm=25cm2，該手機屏幕的細菌密度為=（38+40+42）÷3÷0.1×10×100÷25=l.6×104個/cm2，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此用稀釋涂布平板法統計的活菌數目往往比實際值偏低。