Question

（9分）回答下列關于微生物的問題。

營養缺陷型是指野生型菌株由于基因突變，致使細胞合成途徑出現某些缺陷，喪失合成某些物質的能力，如氨基酸、維生素、堿基等的合成能力出現缺陷，必須在基本培養基（野生型菌株最低營養要求）中添加缺陷的營養物質（補充培養基）才能正常生長的一類突變株�；�本培養基中加入一些營養物質，可以滿足該微生物的各種營養缺陷型生長的培養基稱為完全培養基。營養缺陷型在基礎理論研究和生產應用中有廣泛作用。青霉素能抑制細菌細胞壁的生物合成，可用于淘汰野生型菌株。篩選營養缺陷型菌株一般通過四個環節，即誘變、淘汰野生型、檢出和鑒定營養缺陷型。

1.取新活化枯草芽孢桿菌制備菌懸液，再用紫外線照射處理。下列關于將誘變后存活的個體培養，淘汰野生型菌株的做法和原理，正確的是（多選）

培養在含有青霉素的基本培養基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株

培養在含有青霉素的補充培養基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株

完全培養基中青霉素可以殺死野生型菌株，缺陷型菌株得以生存

補充培養基中缺陷型菌株可以生存，野生型菌株不能生存

基本培養基中野生型可以生長繁殖，青霉素將其殺死

基本培養基中缺陷型不可以生長繁殖，青霉素不能將其殺死

2.在培養皿倒上一層不含菌的基本培養基，待冷凝后加上一層含菌的基本培養基，其后再澆上一層不含菌的基本培養基。經培養后出現菌落，在皿底將菌落標記為A1、A2…，然后在其上再倒一薄層完全培養基，再培養，出現新的菌落，在皿底標記為B1、B2…，則A菌落與B菌落分別較可能是_______________、_______________（均選填野生型/突變型）。

3.將待測菌落處理后涂布于某培養基平板上培養，用滅菌牙簽逐個挑取待測菌，先后點接于A培養基和B培養基平板上。前后位置及號碼相對應。培養后觀察。見圖一。為檢出營養缺陷型，A、B培養基應分別為__________培養基、__________培養基。菌落（      ）為營養缺陷型。 

4.為鑒定上步檢出的營養缺陷型是哪種營養缺陷型，將待測菌種懸液涂于圖二含有基本培養基的培養皿中，培養皿背面劃線標注C、D、E三區。C、D、E為三濾紙片，分別浸有氨基酸混合液、維生素混合液和堿基混合液。培養后觀察。當觀察到________________________現象，說明是該營養缺陷型。圖二培養基也可稱為_________培養基。

5.如檢測菌為堿基類營養缺陷型，要進一步鑒定是哪種堿基營養缺陷型，可同圖二方法加浸該營養物質的濾紙片，如加浸________________的濾紙片。

 

Answer 1

【答案】

1、A  E  F

2、野生型    缺陷型菌株

3、基本      完全      6、8

4、某一濾紙片周圍有菌生長    補充

5、腺嘌呤（胞嘧啶等）

【解析】

試題分析：營養缺陷型是指野生型菌株由于基因突變，致使細胞合成途徑出現某些缺陷，喪失合成某些物質的能力，如氨基酸、維生素、堿基等的合成能力出現缺陷，必須在基本培養基（野生型菌株最低營養要求）中添加缺陷的營養物質（補充培養基）才能正常生長的一類突變株。培養在含有青霉素的基本培養基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株，基本培養基中野生型可以生長繁殖，青霉素將其殺死，基本培養基中缺陷型不可以生長繁殖，青霉素不能將其殺死。為檢出營養缺陷型，A、B培養基應分別為基本培養基、完全培養基，菌落6、8為營養缺陷型。當觀察到某一濾紙片周圍有菌生長現象，說明是該營養缺陷型。圖二培養基也可稱為補充培養基。如檢測菌為堿基類營養缺陷型，要進一步鑒定是哪種堿基營養缺陷型，可同圖二方法加浸該營養物質的濾紙片，如加浸腺嘌呤的濾紙片。

考點：考查微生物的培養。