Question

【題目】酵母菌的維生素、蛋白質含量高，可生產食品和藥品等�？茖W家將大麥細胞的LTPl基因導入啤酒酵母菌中，獲得的啤酒酵母菌種可產生LTP1蛋白，并釀出泡沫豐富的啤酒�；�本的操作過程如圖所示，請據圖回答下列問題：

（1）該技術的最大優點是___________。

（2）從大麥細胞中可直接分離獲得LTP1基因，然后采用PCR大量擴增目的基因，其原理是___________。本操作中為了將LTPI基因導入酵母菌細胞內，所用的載體是___________。

（3）要使載體與LTP1基因連接，首先應使用___________進行切割，然后用___________進行連接。

（4）切割完成后，采用___________酶將載體與LTP1基因連接，連接后得到的DNA分子稱為__________。

（5）此操作中可以分別用含有青霉素、四環素的兩種選擇培養基進行篩選，則有C進入的酵母菌在選擇培養基上的生長情況是___________。

（6）除了看啤酒泡沫豐富與否外，還可用什么方法檢測LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表達？_________。

Answer 1

【答案】可定向改造生物的遺傳性狀體外雙鏈DNA復制質粒限制酶DNA連接酶DNA連接重組DNA（重組質粒）能在含有青霉素的培養基上存活，但不能在含有四環素的培養基上存活檢驗轉基因啤酒酵母菌能否產生LTP1蛋白

【解析】

分析題圖，圖示表示將使啤酒產生豐富泡沫的LTPl基因植入啤酒酵母菌中，使其產生LTPl蛋白，釀出泡沫豐富的啤酒的過程；圖中A為獲取目的基因的過程；B為質粒；C為基因表達載體（重組質粒）。

（1）圖示采用了轉基因技術，該技術最大的優點是可以定向改造生物的遺傳性狀。

（2）PCR技術擴增目的基因的原理是體外雙鏈DNA的復制；圖示將目的基因導入受體細胞所用的運載體是大腸桿菌的質粒。

（3）（4）構建基因表達載體時，需要用同種限制酶切割外源DNA分子（含LTP1基因的DNA片段）和運載體，以產生相同的黏性末端，然后再用DNA連接酶進行連接形成重組質粒。

（5）從圖中可看出，目的基因插入到了質粒的抗四環素基因中，從而破壞了抗四環素基因結構的完整性，但抗青霉素基因仍完整，因此含有重組質粒的啤酒酵母菌在含青霉素的培養基上能存活，而在含四環素的培養基上不能存活。

（6）除了看啤酒泡沫的豐富程度外，還可以通過檢驗轉基因啤酒酵母菌能否產生LTP1蛋白來檢測LTP1基因在啤酒酵母菌中的表達情況。