Question

【題目】下圖是基因工程示意圖，請據圖回答：

（1）從基因文庫中提取的目的基因通過PCR進行擴增時，需使用一種特殊的酶是__________________。

（2）進行過程①時，需用_____________酶切開載體以插入目的基因．載體應有RNA聚合酶識別和結合的部位，以驅動目的基因轉錄，該部位稱為______________。

（3）構建基因表達載體的目的是使___________________________。

（4）若用重組質粒轉入大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是_____________。

（5）在抗蟲作物的培育過程中，將Bt毒蛋白基因導入作物受體細胞時，常用的方法是_____________。

（6）檢測細菌的目的基因是否轉錄出mRNA時，需要用______________做探針，再與相應的物質雜交。

Answer 1

【答案】熱穩定的DNA聚合酶（或Taq酶） 限制 啟動子 使目的基因在受體細胞中穩定存在并遺傳給下一代，使目的基因能夠表達和發揮作用 未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的能力弱 農桿菌轉化法 標記的目的基因

【解析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）通過PCR進行擴增目的基因時，需使用一種特殊的酶是熱穩定的DNA聚合酶；

（2）進行過程①時，需用限制性內切酶切開載體以插入目的基因，載體應有RNA聚合酶識別和結合的啟動子部位，以驅動目的基因轉錄；

（3）構建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩定存在并傳給下一代，使目的基因能夠表達和發揮作用；

（4）若用重組質粒轉入大腸桿菌，由于未處理的大腸桿菌吸收質粒的能力弱，要用處理的大腸桿菌作為受體細胞；

（5）在抗蟲作物的培育過程中，將Bt毒蛋白基因導入作物受體細胞時，常用的方法是農桿菌轉化法；
（6）檢測細菌的目的基因是否轉錄出mRNA時，需要用標記的目的基因做探針，再與相應的物質雜交。