Question

【題目】為擴大耕地面積，增加糧食產量，黃河三角洲等鹽堿地的開發利用備受關注。我國科學家應用耐鹽基因培育出了水稻新品系。圖1為幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖2為耐鹽基因的部分序列，圖3、圖4中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。

（1）圖4中限制性核酸內切酶作用于圖2中的________(填“a”或“b”)處，其特異性表現為_______。如同時用EcoRⅠ和HindⅢ酶切外源DNA，若在每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷，則從理論上講，經該酶酶切后，這些線性DNA分子最多能產生長度不同的DNA片段種類數是______________。

（2）構建重組質粒時，如同時使用EcoRⅠ和HindⅢ酶，則可以形成__________種重組質粒。

（3）由導入目的基因的水稻細胞培養成植株需要利用_________技術，該技術的核心是______________。

（4）為了確定耐鹽轉基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的____________作探針進行分子雜交檢測，又要用_____________方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。

Answer 1

【答案】 a 特異性的識別并切割DNA(識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開） 9 2 植物組織培養 脫分化(去分化）再分化 耐鹽基因(目的基因） 一定濃度鹽水澆灌(移栽到鹽堿地中）

【解析】試題分析：分析圖1：圖1為幾種限制酶識別序列及其切割位點。分析圖2：圖2為耐鹽基因的部分序列，其中a是磷酸二酯鍵，b是氫鍵。分析圖3：圖3表示質粒的結構示意圖，其中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。在質粒上存在SmaI、EcoRI、HindⅢ和BamHI等四個酶切位點，但是SmaI的切割位點就在抗生素抗性基因上，該基因為載體的標記基因，因此不可用該酶切割。分析圖4：圖4表示含有目的基因的外源DNA分子，其中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。在目的基因上，SmaI、EcoRI、HindⅢ和BamHI四種酶也存在酶切位點，但是SmaI酶的切割位點在目的基因中間序列，該酶切割不能獲得完整的基因。

（1）限制酶的作用位點是磷酸二酯鍵，即圖2中a處；限制酶具有特異性，即特異性的識別并切割DNA。如同時用EcoRⅠ和HindⅢ酶切外源DNA，若在每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷，則從理論上講，經該酶酶切后，這些線性DNA分子最多能產生長度不同的DNA片段種類數是9（若只切開左側的EcoRⅠ酶的切割位點，則能形成2種不同長度的DNA片段；若只切開HindⅢ酶的切割位點，則能形成2種不同長度的DNA片段；若只切開右側的EcoRⅠ酶的切割位點，則能形成2種不同長度的DNA片段；若只切開左側EcoRⅠ酶和HindⅢ酶的切割位點，則能形成3種不同長度的DNA片段，其中有2種長度之前已經出現過；若只切開右側EcoRⅠ酶和HindⅢ酶的切割位點，則能形成3種不同長度的DNA片段，其中有2種長度之前已經出現過；若只切開左側EcoRⅠ酶和右側EcoRⅠ酶的切割位點，則能形成3種不同長度的DNA片段，其中有2種長度之前已經出現過）。

（2）構建重組質粒時，如同時使用EcoRⅠ和HindⅢ酶，則可以形成2種重組質粒（一種含有目的基因，另一種不含目的基因）。

（3）將導入目的基因的水稻細胞培養成植株還需要利用植物組織培養技術，該技術的核心是脫分化和再分化。

（4）探針是被標記的目的基因的單鏈，因此為了確定耐鹽轉基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的耐鹽基因（目的基因）作探針進行分子雜交檢測，又要用一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。