Question

【題目】菊天牛是菊花的主要害蟲之一�？蒲腥藛T將抗蟲基因轉入菊花，培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉基因菊花的技術流程。請據圖回答：

（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作為標記基因，菊花葉片對卡那霉素高度敏感）

（1）質粒是基因工程中最常用的載體，其化學本質是________，此外還可用______作為載體。

（2）下圖限制酶M和N切割產生的黏性末端是__________，連接它們所需要的基本工具是___________________。

（3）為了促進土壤農桿菌吸收重組質粒，可用_______處理，使其處于感受態。

（4）將愈傷組織轉移到添加__________、營養物質以及___________和瓊脂的固體培養基中，在適宜條件下進行培養，篩選轉基因菊花。

（5）將轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當比例混合后飼喂菊天牛2 齡幼蟲，實驗結果如下表所示。請據表回答：

組別		死亡率（%）
實驗組	轉基因植株1	60.00
	轉基因植株2	53.33
對照組		13.33

①對照組應飼喂等量的_________________________________________________。

②據表分析，_____________________________差異顯著，說明轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。

Answer 1

【答案】（小型環狀）DNA 噬菌體、動植物病毒 GATC—(—CTAG) DNA連接酶 Ca2+（或“CaCl2”） 一定濃度植物激素 卡那霉素 非轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料的混合物 實驗組與對照組死亡率

【解析】

基因工程常用的運載體有質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒等，質粒上具有復制原點，能自我復制，本質是小型環狀DNA；通常用氯化鈣溶液處理微生物細胞，使之處于能夠吸收周圍DNA的狀態；根據題意，若要初步篩選轉基因菊花，可將愈傷組織轉移到添加一定濃度植物激素、營養物質以及卡那霉素的固體培養基中。

（1）質粒是基因工程中最常用的載體，其化學本質是小型環狀DNA，此外還可用噬菌體、動植物病毒作為載體。

（2）下圖限制酶M和N切割產生的黏性末端是GATC—(—CTAG)，連接它們所需要的基本工具是DNA連接酶。

（3）為了促進土壤農桿菌吸收重組質粒，可用CaCl2處理，使其處于感受態。

（4）根據題意，卡那霉素抗性基因kanR作為標記基因，故要篩選轉基因菊花，需要將愈傷組織轉移到添加一定濃度植物激素、營養物質以及卡那霉素的固體培養基中。

（5）①該實驗的自變量為菊花種類，因變量為菊天牛2齡幼蟲死亡率，故對照組應飼喂等量的正常菊花嫩莖及葉片與人工飼料。

②據表格分析，實驗組和對照組2齡幼蟲死亡率差異顯著，實驗組死亡率高得多，說明轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。