Question

（05江蘇卷）(9分)在植物基因工程中，用土壤農桿菌中的Ti質粒作為運載體，把目的基因重組人Ti質粒上的T-DNA片段中，再將重組的T-DNA插入植物細胞的染色體DNA中。

（1）科學家在進行上述基因操作時，要用同一種            分別切割質粒和目的基因，質粒的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過        而黏合。

（2）將攜帶抗除草劑基因的重組Ti質粒導入二倍體油菜細胞，經培養、篩選獲得一株有抗除草劑特性的轉基因植株。經分析，該植株含有一個攜帶目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看作是雜合子。理論上，在該轉基因植株自交F₁代中，仍具有抗除草劑特性的植株占總數的            ，原因是             。

（3）種植上述轉基因油菜，它所攜帶的目的基因可以通過花粉傳遞給近緣物種，造成“基因污染”。如果把目的基因導人葉綠體DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是                 。

Answer 1

答案：（1）限制性內切酶     堿基互補配對

（2）3／4    雌雄配子各有1／2含抗除草劑基因；受精時，雌雄配于隨機結合

（3）葉綠體遺傳表現為母系遺傳，目的基因不會通過花粉傳遞在下一代中顯現出來

解析：本題考查的知識點是基因工程和細胞質遺傳的特點。（1）目的基因和運載體結合之前，要用同一種限制性內切酶分別切割質粒和目的基因，使其產生相同的黏性末端，將切下的目的基因的片斷插入質粒的切口處，再加入適量的DNA連接酶（連接部位是磷酸二脂鍵），質粒的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可以黏合，形成重組DNA。（2）獲得有抗除草劑特性的轉基因植株，看作雜合子，抗除草劑性狀為顯性，不抗除草劑性狀為隱性，該轉基因植株（Aa）自交F1代中，由于雌雄配子各有l／2含抗除草荊基因；受精時，雌雄配子隨機結合，所以具有抗除草劑特性的植株占總數的3/4。（3）把目的基因導入葉綠體DNA中，由于是屬于細胞質遺傳，目的基因主要存在于卵細的胞細胞質中，精子細胞只含有極少量細胞質，因此不會通過花粉傳遞給下一代造成“基因污染”。