Question

【題目】已知某RNA病毒包膜表面的S蛋白負責病毒的吸附、融合和侵入宿主細胞，也是誘導宿主體液免疫反應的抗原。針對該病毒的S蛋白研制疫苗和抗體的部分流程如下圖�；卮鹣铝袉栴}：

（1）過程①提取該抗原的RNA并將RNA____形成DNA。要獲得大量的病毒基因可利用PCR技術擴增，其前提是要有一段已知S蛋白基因的脫氧核苷酸序列，以便____。

（2）過程③中，常利用改造后的腺病毒來充當載體攜帶S蛋白基因，則改造后的腺病毒能作為載體需具備的條件有____（答出兩點即可），拼裝S蛋白基因重組載體所需的工具酶有____。

（3）提取的S蛋白可作為疫苗使用，選擇以病毒包膜的S蛋白作為疫苗比開發減毒病毒作為疫苗更安全，主要原因是____。

（4）通過過程⑦獲得的X稱為____，其產物的主要優點有____（答出兩點即可）。

Answer 1

【答案】逆轉錄 合成引物 能自主復制、有多個限制酶切位點、有標記基因、對宿主細胞無害 限制酶和DNA連接酶 蛋白質不具侵染性，不會破壞細胞結構 雜交瘤細胞 特異性強、靈敏度高、可大量制備

【解析】

分析題圖可知，圖示為利用轉基因技術和動物細胞融合技術制備抗S蛋白單克隆抗體流程，利用病毒RNA經過①過程逆轉錄得到病毒DNA，通過②PCR技術擴增獲得大量S蛋白基因，③過程為基因表達載體的構建，④過程為將目的基因導入受體細胞，⑤過程為S蛋白作為抗原刺激小鼠B細胞，⑥過程為B細胞增殖分化生成漿細胞，⑦過程為利用誘導劑誘導漿細胞與小鼠骨髓瘤細胞進行融合并篩選，獲得產生抗S蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞，再經過⑧大規模培養得到抗S蛋白單克隆抗體。

（1）以RNA為模板合成DNA的過程稱為逆轉錄；利用PCR技術擴增目的基因時，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據這一序列合成引物，引物在PCR擴增過程可引導子鏈的延伸。

（2）為攜帶外源DNA進入受體細胞并能穩定存在和表達，作為載體需具備的條件有：能自主復制、有多個限制酶切位點、有標記基因、對宿主細胞無害。構建S蛋白基因重組載體的過程需要用相同的限制酶切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶將二者連接起來。

（3）減毒的病毒可能會恢復活性，可能會對人體細胞造成一定的傷害，從而引起一系列并發癥，而S蛋白與減毒病毒相比，不具侵染性，不會破壞細胞結構，因此用S蛋白作為疫苗更安全。

（4）由分析可知，⑦過程獲得的X為雜交瘤細胞，能產生抗S蛋白單克隆抗體，單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高、可大量制備的優點。