Question

【題目】煙草是有重要經濟價值的雙子葉植物，易受TMV(煙草花葉病毒)感染而大幅度減產。絞股藍細胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMⅤ感染。研究人員利用轉基因技術培育出了抗TMⅤ煙草，操作流程如圖所示。

(1)①表示遺傳信息流動中的___________過程，所需原料為___________。過程③所需要的工具酶是____________________________________________。

(2)大量擴增目的基因可以使用PCR技術，該技術包括變性、退火、延伸三個步驟，變性這一驟的目的是________________________________。

(3)過程④最常用的方法是___________，過程⑤用到的細胞工程技術是___________。

(4)過程⑥還需要進行基因工程操作步驟中的______________________，其中，在個體水平上檢驗獲得的煙草能否抗TM的方法是_________________________________。

Answer 1

【答案】逆轉錄 四種脫氧核苷酸 限制酶和DNA連接酶 使DNA解旋為單鏈（DNA解旋） 農桿菌轉化法 植物組織培養 目的基因的檢測與鑒定 用TMV感染煙草，觀察煙草是否被感染（患�。�

【解析】

本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因文庫的種類，掌握兩種基因文庫的區別；識記PCR技術的條件；識記基因工程的具體操作步驟及相關細節，能結合所學的知識準確答題。

分析題圖：①逆轉錄，②提取目的基因，③構建基因表達載體，④將目的基因導入受體細胞，⑤植物組織培養，⑥通過目的基因的檢測與鑒定進行篩選。

(1) ①表示以RNA為模板逆轉錄形成DNA的過程，所需原料為DNA的單體：4種脫氧核苷酸。過程③構建基因表達載體的過程需要用同種限制酶切割目的基因與運載體，用相同的DNA連接酶連接目的基因與運載體的末端。

(2) PCR技術中的變性是利用高溫使DNA發生變性，解旋形成單鏈。

(3)過程④將目的基因導入植物體細胞的方法常用農桿菌轉化法，過程⑤受體細胞通過植物組織培養技術得到再生植株。

(4)過程⑥從再生植株中篩選成功轉基因的抗TMV煙草植株還需要進行基因工程操作步驟中的目的基因的檢測與鑒定；其中，若從個體水平鑒定獲得的煙草能否抗TMV，可通過接種煙草花葉病毒的方法來確定。