【題目】口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一種動物傳染病,目前常用接種弱毒疫苗的方法預防。疫苗的主要成分是該病毒的一種結構蛋白VP1。科學家嘗試利用轉基因番茄來生產口蹄疫疫苗。請回答下列問題:
(1)如圖是VP1基因、農桿菌Ti質粒結構示意圖,若用以構建具有VP1基因的基因表達載體,還需要在質粒中插入______,該結構的作用是______。
(2)口蹄疫病毒的遺傳物質為RNA,則獲得可重組到質粒的VP1基因必須用到______酶。要獲得大量VP1基因,可利用PCR技術進行擴增,擴增時需要設計______種引物。PCR技術中所用的DNA聚合酶與生物體內的DNA聚合酶有何區別______。
(3)通常用BamHⅠ、HindⅢ兩種限制酶切割VP1基因和Ti質粒的目的是______;要篩選出含有該目的基因表達載體的農桿菌,首先需要在含______的培養基上進行。
(4)VP1基因應插入到農桿菌Ti質粒的T-DNA上,通過轉化作用進入番茄細胞并插入到______,使VP1基因能夠穩定存在并發揮作用。
(5)獲得表達VP1蛋白的番茄植株以后,要進行免疫效力的測定,具體方法是:將從轉基因番茄葉片中提取的VP1蛋白注射到一定數量的豚鼠體內,每半個月注射一次,三次注射后檢測豚鼠血液中產生的______數量,為了使結果可信,應設置空白對照組,注射______。
【答案】啟動子 RNA聚合酶識別、結合的部位,驅動基因轉錄 逆轉錄 2 耐高溫 防止VP1基因、Ti質粒的自身環化(和任意連接) 卡那霉素 染色體DNA VP1蛋白的抗體 等量生理鹽水
【解析】
基因工程技術的基本步驟:
(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。
(2)基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。
(3)將目的基因導入受體細胞:根據受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。
(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
(1)構建具有VP1基因的基因表達載體還需要在質粒中插入啟動子,啟動子是RNA聚合酶的識別、結合位點,能啟動轉錄過程。
(2)口蹄疫病毒的遺傳物質為RNA,可以RNA為模板逆轉錄獲得VPI基因;PCR技術可在體外大量擴增目的基因,該過程中需要設計2種引物分別與模板鏈結合,PCR擴增過程中需要耐高溫的DNA聚合酶催化子鏈的延伸。
(3)用BamH I、HindIII兩種限制酶切割出的末端完全不同,這樣可以防止目的基因、運載體自身環化,也能防止目的基因和運載體反向連接,即可以保證目的基因和質粒的定向連接。由圖可知,標記基因是卡那霉素抗性基因,因此要篩選出含有該目的基因表達載體的番茄細胞,首先需要在含卡那霉素的培養基上進行。
(4)VP1基因應插入到農桿菌Ti質粒的T-DNA上,通過轉化作用進入番茄細胞并插入到染色體DNA,使VP1基因能夠穩定維持并發揮作用。
(5)獲得表達VP1蛋白的番茄植株以后,要進行免疫效力的測定,具體方法是:將從轉基因番茄葉片中提取的VP1蛋白質注射到一定數量的豚鼠體內,每半個月注射一次,三次注射后檢測豚鼠血液中產生的VP1蛋白的抗體數量,為了使結果可信,應設置空白對照組,注射VP1蛋白的抗體等量生理鹽水。
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【題目】山羊性別決定方式為XY型。下面的系譜圖表示了山羊某種性狀的遺傳,圖中深色表示該種性狀的表現者。已知該性狀受一對等位基因(A、a)控制,在不考慮染色體變異和基因突變的情況下,回答下列問題:
(1)據系譜圖推測,該性狀為________(填“隱性”或“顯性”)性狀。
(2)假設控制該性狀的基因僅位于Y染色體上,則其遺傳特點是________________________,在第Ⅲ代中表現型不符合該基因遺傳規律的個體是________(填個體編號)。
(3)若控制該性狀的基因僅位于X染色體上,則系譜圖中Ⅱ—2的基因型是________。Ⅲ—2與Ⅲ—4雜交,其后代表現出該性狀的概率為________。
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【題目】生物量是指某一調查時刻單位面積內現存生物的有機物總量?蒲腥藛T對我國某自然保護區地震導致山體滑坡30年后,恢復群落和未受干擾的原始林群落不同植被類型的生物量進行了研究。
(1)科研人員在兩個群落中隨機選取多個樣地,收獲全部植物,按照_________分類后,測定生物量,結果如圖所示。圖中代表恢復群落生物量的是_______(填“S1”或“S2”)。
(2)地震導致山體滑坡后,原有植被雖不存在,但還可能存在植物的種子、可能發芽的地下莖或植物根系等,在這一基礎上形成恢復群落的過程為_____演替。未受干擾的原始林群落具有較好的_______結構,有利于提高光能利用率。
(3)恢復群落植被的總生物量只有原始林群落的20%,這是由于山體滑坡后________穩定性較低,群落在短時間內難以恢復到原狀。
(4)恢復群落植被不易恢復的關鍵限制因子是__________條件,可利用人工措施改善這一條件,幫助群落植被快速恢復。
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【題目】如圖表示甲、乙兩種植物CO2釋放量隨光照強度的變化曲線,下列分析正確的是( )
A.光照強度為c時,甲、乙兩種植物固定的二氧化碳的量相等
B.光照強度為b1時,甲植物葉肉細胞不發生呼吸作用
C.圖中曲線表明,乙植物的光飽和點是e點
D.甲、乙兩種植物中適宜在弱光環境中生長的是乙植物
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【題目】如圖表示某高等植物光合作用與細胞呼吸過程中物質變化的關系,下列說法正確的是
A.2過程消耗的ATP來自1、3、4、5過程產生的ATP
B.1、2過程在葉綠體中,3、4、5過程在線粒體中進行
C.1過程產生的[H]參與2過程,3和4過程產生的[H]與氧結合產生水
D.高等植物所有的細胞都可以進行1、2、3、4、5過程
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【題目】在一個玻璃容器內,裝入一定量的符合酵母菌生長的營養液,接種少量的酵母菌,每隔一段時間測定酵母菌的個體數量,得到如圖所示曲線。下列相關敘述錯誤的是( )
A. 實驗初期酵母菌增長緩慢是由于種內斗爭強
B. 該實驗中常用抽樣檢測法對酵母菌進行計數
C. 酵母菌種群數量隨時間的變化與營養條件有關
D. 該實驗過程中酵母菌種群的年齡組成會發生變化
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【題目】如圖左側為葉肉細胞中相應的生理活動過程,右側為葉綠體結構示意圖。
(1)在 ②、③兩處所發生的反應分別稱為_________________________。
(2)在上圖左側所示植物的葉肉細胞中,在乙細胞器中產生的CO2供給甲利用需要經過_____層生物膜。
(3)甲、乙兩種細胞器都是重要的“能量轉換器”,在乙細胞器中釋放能量最多的過程是有氧呼吸第_____________階段。
(4)圖中甲、乙兩種結構的膜面積都很大,其中甲增加膜面積是通過___________。
(5)大部分高等植物在缺氧情況下,植物的細胞呼吸的產物是_______________________。
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【題目】T淋巴細胞按照功能和表面標志物不同,可以分成很多種類,其中CD4-T細胞(含標志物CD4)和CD8-T細胞(含標志物CD8)在特異性免疫中發揮著非常重要的作用。下圖是它們參與特異性免疫的部分過程,下列分析不正確的是
A. 圖中的T細胞都能增殖分化為效應T細胞
B. X物質很可能是引起特異性免疫的抗原
C. CD4-T細胞能參與體液免疫和細胞免疫
D. CD8-T細胞作用的靶細胞可能有癌細胞
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