Question

【題目】研究表明從母瘤分離脫落的癌細胞首先要與正常細胞粘附才能轉移。為研究物質X對癌細胞與毛細血管內皮細胞間粘附的影響，請根據以下提供的實驗材料與用具，完善實驗思路，預測實驗結果并進行分析與討論。

材料與用具：培養瓶若干個、液體培養基、物質X、癌細胞細胞株、內皮細胞懸液、CO2培養箱、PBS溶液（用于洗去未粘附的細胞）

（要求與說明：不考慮培養液成分變化對培養物的影響；實驗條件適宜）

（1）實驗思路：

①取培養瓶若干個均分為三組，分別加入等量且適量的液體培養基和內皮細胞懸液，置于37℃的CO2培養箱中培養24h，使培養瓶中鋪滿單層內皮細胞。

②_____。

③同時分別_____。置于37℃的CO2培養箱中培養一段時間。

④用PBS溶液洗去未貼壁的細胞，測定相關值并計算細胞粘附率。

⑤對實驗數據進行分析與處理。

（2）下圖為實驗所測得的細胞粘附率，請根據圖示結果，用文字描述該實驗結果并得出實驗結論：

結果：_____。

結論：_____。

（3）分析與討論

①實驗用的癌細胞細胞株可以通過_____法建立。獲取癌細胞時需用_____處理癌細胞株，將癌細胞轉入含內皮細胞的培養瓶后所進行的培養稱為_____培養。

②導致癌細胞從母瘤分離脫落的原因可能是_____。根據實驗可推測：物質X可能是通過減少腫瘤細胞與毛細血管內皮細胞的粘附率，來達到_____的作用。

Answer 1

【答案】加入用液體培養基配制的不同濃度的物質X（濃度為100和300μg/ml），對照組加入等體積的液體培養基 取等量的癌細胞轉入上述培養瓶中（取等量的癌細胞轉入鋪滿單層內皮細胞的培養瓶中） 與正常對照組相比，加入物質X后，癌細胞與內皮細胞間的粘附率明顯降低，同時隨著劑量越高，癌細胞與內皮細胞間的粘附率下降越明顯。 物質X可降低癌細胞與內皮細胞間的粘附率。（而且作用效果與物質X的濃度有關） 克隆培養 胰蛋白酶 傳代 癌細胞膜表面粘連蛋白（糖蛋白）減少 抑制癌細胞轉移

【解析】

1、本實驗的目的是為了研究不同濃度的物質X對癌細胞與毛細血管內皮細胞間粘附的影響，因此自變量是不同濃度放入物質X溶液，因變量是細胞粘附率，其余均為無關變量。

2、實驗設計應該遵循對照原則和單一變量原則，此外還應該遵循平行重復原則，這樣可以減小實驗的誤差。

（1）實驗思路：根據分析該實驗的自變量和因變量，所以在步驟②中設計自變量。

②加入用液體培養基配制的不同濃度的物質X（濃度為100和300μg/ml），對照組加入等體積的液體培養基。

③同時分別取等量的癌細胞轉入上述培養瓶中（取等量的癌細胞轉入鋪滿單層內皮細胞的培養瓶中）。置于37℃的CO2培養箱中培養一段時間。

（2）結果：與正常對照組相比，加入物質X后，癌細胞與內皮細胞間的粘附率明顯降低，同時隨著劑量越高，癌細胞與內皮細胞間的粘附率下降越明顯。

結論：物質X可降低癌細胞與內皮細胞間的粘附率。（而且作用效果與物質X的濃度有關）。

（3）分析與討論：

①實驗用的癌細胞細胞株可以通過克隆培養法建立。獲取癌細胞時需用胰蛋白酶，將其分散成單個細胞，將癌細胞轉入含內皮細胞的培養瓶后所進行的培養稱為克隆培養。

②導致癌細胞從母瘤分離脫落的原因可能是癌細胞膜表面粘連蛋白（糖蛋白）減少。根據實驗可推測：物質X可能是通過減少腫瘤細胞與毛細血管內皮細胞的粘附率，來達到抑制癌細胞轉移的作用。