Question

【題目】豆漿是深受中國百姓喜愛的飲品，但易變質，保質期較短�？蒲腥藛T對變質豆漿中的腐敗細菌進行分離，并研究了乳酸鏈球菌素（多肽，天然食品防腐劑）對腐敗細菌的抑制效果，為生產豆漿時優化保質方法提供依據。主要研究過程如下：

①豆漿變質處理：將2種市售豆漿A、B和自制豆漿在無菌操作臺上分別裝入已滅菌的250mL三角瓶中，密封、37℃條件下放置7d后，豆漿發生變質。

②腐敗細菌的初步分離和計數：取變質的豆漿在無菌條件下接種到細菌培養基上，培養一段時間后，統計各培養基上菌落種類和數量。結果如表：

細菌序號	菌落特征	菌落直徑/mm	菌落數/個
			豆漿A	豆漿B	自制豆漿
S1	表面有白色絨毛，圓形邊緣不規則	5	5	3	7
S2	白色，表面無絨毛，有白色液滴	1-2	18	11	24
S3	黃色，表面無絨毛，如同黃色液斑	20-30	11	7	15

③比較乳酸鏈球菌素添加量對腐敗細菌的抑制效果：以自制的新鮮豆漿為材料，經相應處理后，在37℃下放置35d后，統計豆漿中腐敗細菌數量，結果如圖：

（1）日常生活中經常用到的消毒方法是______________，步驟②中培養基的滅菌方法是_________________________。

（2）步驟②中適宜采用的接種方法是__________，固體培養基制備的步驟為____________________。培養中統計菌落種類和數量時要每隔24h觀察統計一次，直到各類菌落數目穩定，以防止____________________________。

（3）步驟③結果表明，最能耐受乳酸鏈球菌素的細菌是___________，為有效防止豆漿腐敗，在生產中乳酸鏈球菌素的添加量應控制在________mgkg-1左右。

（4）乳酸鏈球菌素是一種天然食品防腐劑，它是由34個氨基酸組成的多肽。與用抗生素防腐相比，使用乳酸鏈球菌素防腐的優點是__________________。

Answer 1

【答案】煮沸消毒法 高壓蒸汽滅菌法 稀釋涂布平板法 計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板 因培養時間不足而導致遺漏菌落的種類和數目 S1 250 食用后會被人體消化，不會改變人體腸道內正常菌群

【解析】

由題文描述可知：該題綜合考查學生對微生物的實驗室培養基、微生物的分離和計數等相關知識的識記和理解能力，以及對實驗結果的分析能力。

(1) 日常生活中經常用到煮沸消毒法。在實驗室中，通常采用高壓蒸汽滅菌法對培養基進行滅菌。

(2) 步驟②需要對“腐敗細菌進行初步分離和計數”，因此適宜采用的接種方法是稀釋涂布平板法。固體培養基制備的步驟為：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。為了防止因培養時間不足而導致遺漏菌落的種類和數目，統計菌落的種類和數量時要每隔24h觀察統計一次，直到各類菌落數目穩定為止。

(3) 分析曲線圖可知，隨著乳酸鏈球菌素添加量的增大，S1細菌數量的相對值最高，由此表明最能耐受乳酸鏈球菌素的細菌是S1。當乳酸鏈球菌素添加量為250mg．kg-1后，細菌數量的相對數值不再隨乳酸鏈球菌素添加量的增大而降低；可見，為有效防止豆漿腐敗，在生產中乳酸鏈球菌素的添加量應控制在250mg．kg-1左右。

(4) 乳酸鏈球菌素是一種由34個氨基酸組成的多肽，食用后會被人體消化，不會改變人體腸道內正常菌群，這正是使用乳酸鏈球菌素防腐比使用抗生素防腐的優點所在。