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近20年來,PCR技術(多聚酶鏈式反應)成為分子生物學實驗室的一種常規實驗手段,其原理是利用DNA半保留復制,在試管中進行DNA的人工復制(如圖),在短時間內,將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍,從而使實驗室所需要的遺傳物質不再受限于活的生物體。

(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開,稱為________;而在細胞中是在________酶的作用下進行的。

(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個特定區段,應該加入________種特定的引物。當溫度降低至55 ℃時,引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結合,在DNA聚合酶的作用下,只能在引物的________端連接脫氧核苷酸,兩條子鏈的延伸方向都是____________。

(3)PCR技術的必需條件,除了模板、原料、酶之外,至少還有三個條件,即液體環境、適宜的________和________,前者由________自動調控,后者則靠____來維持。

(4)通過PCR技術使DNA分子大量復制,如果將一個用15N標記的DNA分子放入試管中,以14N標記的脫氧核苷酸為原料,連續復制四次之后,則15N標記的DNA分子占全部DNA分子總數的比例是________。

 

【答案】

(1)氫 解旋 解旋   (2)兩 3′ 從子鏈的5′端向3′端延伸  (3)溫度 酸堿度 PCR儀 緩沖液  (4)1/8

【解析】PCR技術加熱是使DNA雙鏈間氫鍵斷開,稱為解旋,在細胞內是由解旋酶進行的;將一個用15N標記的DNA分子放入試管中連續復制四次,會得到24=16個DNA分子,含15N的DNA分子有兩個(原因半保留復制),則15N標記的DNA分子占全部DNA分子總數的比例是2/16=1/8。

 

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(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開,稱為________;而在細胞中是在________酶的作用下進行的。
(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個特定區段,應該加入________種特定的引物。當溫度降低至55 ℃時,引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結合,在DNA聚合酶的作用下,只能在引物的________端連接脫氧核苷酸,兩條子鏈的延伸方向都是____________。
(3)PCR技術的必需條件,除了模板、原料、酶之外,至少還有三個條件,即液體環境、適宜的________和________,前者由________自動調控,后者則靠____來維持。
(4)通過PCR技術使DNA分子大量復制,如果將一個用15N標記的DNA分子放入試管中,以14N標記的脫氧核苷酸為原料,連續復制四次之后,則15N標記的DNA分子占全部DNA分子總數的比例是________。

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(1)加熱使DNA雙鏈間的______鍵完全打開,稱為_______;而在細胞中是在_______酶的作用下進行的。
(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個特定區段,應該加入__________種特定的引物。當溫度降低至55℃時,引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結合,在DNA聚合酶的作用下,只能在引物的__________端連接脫氧核苷酸,兩條子鏈的延伸方向都是_________。
(3)PCR技術的必需條件,除了模板、原料、酶之外,至少還有三個條件,即液體環境、適宜的_________和________,前者由________自動調控,后者則靠_______來維持。
(4)通過PCR技術使DNA分子大量復制,如果將一個用15N標記的DNA分子放入試管中,以14N標記的脫氧核苷酸為原料,連續復制四次之后,則15N標記的DNA分子占全部DNA分子總數的比例是____________。

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科目:高中生物 來源:2012-2013學年黑龍江省鶴崗一中高二下學期期末考試生物試卷(帶解析) 題型:綜合題

基因工程自20世紀70年代興起后,發展迅猛,成果顯著。
Ⅰ利用大腸桿菌生產人胰島素時,構建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等,其中啟動子的作用是       ______。在用表達載體轉化大腸桿菌時,常用            處理大腸桿菌,以利于表達載體進入;為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA,可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交,該雜交技術稱為       __________   。為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成蛋白質,常用______________________技術。
Ⅱ近10年來,PCR技術(多聚酶鏈式反應)成為分子生物學實驗室的一種常規手段,下圖為PCR原理示意圖,據圖回答問題。

(1)基因工程中,利用PCR技術來________________,PCR技術依據的原理是DNA的半保留復制,生物體內也能完成DNA的復制,但有所不同,圖中A過程稱為____________,在生物體內需要____________才能完成。圖中B 過程的完成需要_________等條件(3分)。
(2)若DNA樣品的長度為100個堿基對,且A占15%,則完成三次循環,共需要提供的胞嘧啶脫氧核苷酸___________個。

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(1)加熱使DNA雙鏈間的______鍵完全打開,稱為_______;而在細胞中是在_______酶的作用下進行的。

(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個特定區段,應該加入__________種特定的引物。當溫度降低至55℃時,引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結合,在DNA聚合酶的作用下,只能在引物的__________端連接脫氧核苷酸,兩條子鏈的延伸方向都是_________。

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