Question

【題目】利用基因編輯技術將病毒外殼蛋白基因導入豬細胞中，然后通過核移植技術培育基因編輯豬，可用于生產基因工程疫苗。如圖為基因編輯豬培育流程，請回答下列問題：

（1）對 1 號豬使用_____處理，使其超數排卵。選取處在_____時期的卵母細胞，去核后用于核移植，原因可能是_________。

（2）采集 2 號豬的組織塊，用_____或_____處理獲得分散的成纖維細胞，放置于37℃的 CO2 培養箱中培養。通常選擇 10 代以內的成纖維細胞用于核移植的供體細胞，原因是_____。

（3）產出的基因編輯豬的性染色體來自于______號豬，基因編輯豬的的產生過程是_____（填“有性生殖”或“無性生殖”）。

（4）為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導入 4 號豬，可采用的方法有_____。

Answer 1

【答案】促性腺激素 減數第二次分裂中期 卵母細胞的細胞質中含有促進細胞核發育的物質 胰蛋白酶 膠原蛋白酶 保持細胞正常的二倍體核型 2 無性生殖 DNA 測序技術（DNA 分子雜交技術）

【解析】

基因編輯是指對基因組進行定點修飾的一項新技術。利用該技術，可以精確地定位到基

因組的某一位點上，在這位點上剪斷靶標DNA片段并插入新的基因片段。此過程既模擬了基因的自然突變，又修改并編輯了原有的基因組，真正達成了“編輯基因”。

動物細胞培養過程

取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個細胞，將處理后的細胞移入培養基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時，細胞就會停止分裂增殖，出現接觸抑制。此時需要將出現接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外，原代培養就是從機體取出后立即進行的細胞組織培養。

（1）圖中1號豬的作用是提供卵母細胞，為了獲得更多的卵母細胞，需要對其使用促性腺激素處理，促其超數排卵。通常選取處在減數第二次分裂中期時期的卵母細胞，去核后用于核移植，選擇卵母細胞的原因是卵母細胞的細胞質中含有促進細胞核發育的物質，從而促進細胞核全能性表現。

（2）圖中2號豬是供核的個體，因此需要獲取2號豬的組織塊，然后用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理獲得單細胞懸液，置于37℃的 CO2 培養箱中培養。由于培養到10 代以內的細胞能保持細胞正常的二倍體核型，因此，通常選擇10代以內的成纖維細胞作為用于核移植的供體細胞。

（3）根據圖中的生產流程可知，產出的基因編輯豬的性染色體來自于2號豬，因為提供細胞核的細胞來源于2號豬，由于基因編輯豬的的產生過程沒有經過兩性生殖細胞的融合，因此基因編輯豬的生產過程屬于無性生殖。

（4）檢測目的基因是否導入受體細胞的方法是DNA分子雜交技術，因此，這里檢測病毒外殼蛋白基因是否被導入 4 號豬應采用的方法為DNA 測序技術（DNA 分子雜交技術）。