Question

【題目】體細胞核移植已經成功克隆了多種哺乳動物，但成功率很低。研究表明一定濃度的TSA（曲古抑菌素A）能提高克隆胚胎的囊胚發育率及克隆后代的存活率，為了優化TSA的處理方案，科研人員研究了TSA濃度及處理時間對豬核移植胚胎體外發育的影響，其基本操作過程如下，過程①中添加TSA。請據圖回答問題：

（1）收集的卵母細胞應培養到______期進行去核，去核的同時一并將______ 去掉。

（2）過程①除加入激素、氨基酸、維生素等營養物質外，還需加入__等天然成分，培養的氣體中應控制5%左右的CO2,其目的是______。

（3）在進行過程②操作前應對代孕母豬進行______ 處理，使生殖器官處于相同的生理狀態；通過手術進行過程②操作，應從______（部位）將早期胚胎注入子宮，可提高胚胎的著床率。

（4）下表1表示實驗一（不同濃度TSA處理重組細胞12h）的實驗結果，下表2表示在實驗一基礎之上做的實驗二（某濃度TSA處理重組細胞12h和24h）的實驗結果。實驗二所用TSA的濃度是___，表2數據表明______ 有助于提高豬核移植胚胎的發育潛能。

Answer 1

【答案】減數第二次分裂中 第一極體 動物血清 維持培養液的pH 同期發情處理 子宮角 40nmol·L-1 控制好TSA處理的時間（或將TSA處理時間控制12小時左右）

【解析】

上圖為細胞核移植過程，將去核的卵母細胞與成纖維細胞融合形成重組細胞，經過①動物細胞培養形成早期胚胎A，將早期胚胎經過胚胎移植到代孕母豬體內，經過代孕母豬孕育后并分娩。

（1）卵母細胞在體外培養到減數第二次分裂中期時進行去核，去核的同時一并將第一極體去掉。

（2）過程①為動物細胞培養的過程，培養基中除加入激素、氨基酸、維生素等營養物質外，還需加入動物血清等天然成分，動物細胞培養過程提供二氧化碳的作用是維持培養液的pH。

（3）將早期胚胎移入代孕母豬的子宮的過程為胚胎移植，為使代孕母豬與供體豬的生殖器官的生理變化相同，移植前需要對代孕母豬做同期發情處理。通過手術進行胚胎移植時，應從子宮角將早期胚胎注入子宮，可提高胚胎的著床率。

（4）本實驗結果表觀，40μmol·L－1的TSA對豬囊胚的形成較為有利，其判斷依據是囊胚數占重組細胞數的比例較高。實驗二的自變量是TSA處理時間，故實驗所用TSA的濃度應最適，所以實驗二所用TSA的濃度是40μmol·L－1，表2數據表明TSA處理時間為12小時比處理24小時有利于囊胚數形成，所以表2數據表明控制好TSA處理的時間（或將TSA處理時間控制12小時左右）有助于提高豬核移植胚胎的發育潛能。