Question

【題目】尿素是一種重要的農業氮肥，但若不經細菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數量繁多，同學們試圖篩選出能高效降解尿素的細菌．設計了“土壤中分解尿素細菌的篩選與計數實驗”，過程如圖所示：

（1）為達到實驗目的，本實驗所配置的培養基成分應包括：__．（填入編號）

①水②無機鹽（不含氮） ③NH4NO3④尿素 ⑤葡萄糖 ⑥牛肉膏⑦蛋白胨 ⑧伊紅美藍 ⑨瓊脂

（2）為能夠進行菌落計數，本實驗應采用的接種方法是__，接種工具是__。

（3）在接種前，進行①～⑤系列操作的意圖是__．根據題意，為使菌液稀釋10倍，每次應加入的無菌水量是__ml。

（4）甲同學設計了“計算→稱量→溶解→滅菌→倒平板→接種土壤樣本→菌落計數”的實驗步驟，該同學忘記了在__（步驟名稱）之前還需要__（遺忘的步驟名稱）。

（5）乙同學分別接種了3個培養皿，一段時間后三個培養皿中分別長出了54個、46個、50個菌落，根據甲的實驗結果，該1g土壤樣本中約有分解尿素的細菌__個。

Answer 1

【答案】①②④⑤⑨ 涂布法 無菌玻璃刮鏟 使菌液逐漸按梯度稀釋 9 滅菌 調PH值 5×107

【解析】

（1）微生物培養基的成分主要包括碳源、氮源、水、無機鹽，碳源選擇⑤葡萄糖；要篩選能夠分解尿素細菌，需要加入④尿素作為唯一氮源；對細菌進行計數時需要利用稀釋涂布平板法，因此需要在培養基中加入⑨瓊脂作為凝固劑；另外①水和②無機鹽（不含氮）是培養基必需的。所以為達到實驗目的，本實驗所配置的培養基成分應包括①②④⑤⑨。

（2）為能夠進行菌落計數，本實驗應采用稀釋涂布平板法，接種工具為無菌玻璃刮鏟。

（3）在接種前，進行①～⑤系列操作的意圖是使菌液逐漸按梯度稀釋。根據題意，為使菌液稀釋10倍，菌液取1ml，則每次應加入的無菌水量是9ml。

（4）培養基配置的基本過程：計算、稱量、溶化、調pH、滅菌、倒平板五個步驟，甲同學設計的實驗步驟，該同學忘記了在滅菌之前還需要調PH值。

（5）根據圖解可知，對菌液進行稀釋時共稀釋了106倍，乙同學分別接種了3個培養皿，一段時間后三個培養皿中分別長出了54個、46個、50個菌落，根據甲的實驗結果，該1g土壤樣本中約有分解尿素的細菌=（54+46+50）÷3×106=5×107個。