Question

【題目】人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

(1)htPA基因與載體用________切割后，通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用____________技術。

(2)為獲取更多的卵(母)細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要經過________，才具備受精能力。

(3)將重組表達載體導入受精卵常用的方法是________。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行________。利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這體現了早期胚胎細胞的________。

(4)若在轉htPA基因母羊的羊乳中檢測到__________，說明目的基因成功表達。

Answer 1

【答案】

(1)同種限制性核酸內切酶(或同種限制酶) DNA分子雜交(或核酸探針)

(2)超數排卵 獲能(處理)

(3)顯微注射法 性別鑒定 全能性

(4)htPA(或人組織纖溶酶原激活物)

【解析】

（1）用同種限制酶切割質粒和含有htPA基因的DNA片段可產生相同的黏性末端，便于構建基因表達載體；通常采用DNA分子雜交技術來檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA。

（2）為獲得更多的卵母細胞，通常對供體母羊注射促性腺激素使其超數排卵；采集的精子需要經過獲能處理才具備受精能力。

（3）通常用顯微注射法將重組表達載體導入動物的受精卵；為了獲得母羊，移植前需要對已成功轉入目的基因的胚胎進行性別鑒定；早期胚胎細胞具有全能性，可利用胚胎分割和胚胎移植技術獲得多個轉基因個體。

（4）htPA基因的表達產物為人組織纖溶酶原激活物，若在轉基因母羊的羊乳中檢測到人組織纖溶酶原激活物，說明目的基因成功表達。