Question

【題目】P53 基因是正常細胞內重要的抑癌基因，研究表明 P53 基因突變可導致肝臟細胞癌變�？茖W家研究發現 P53基因對體外培養的肝癌細胞生長有抑制作用，請回答下列問題：

（1）切下新鮮的肝癌組織，在 37℃下用_____消化 30～40 分鐘，用培養液制成_____在培養箱中培養，在培養基中加入一定量的抗生素，其目的是_______________________。

（2）若P53 基因兩側的一段核苷酸序列是已知的，則獲取P53 基因的方法通常是_____。

（3）將 P53 基因經過一系列的處理并與脂質體混合，將混合物滴加至肝癌細胞上，輕輕混勻。最后篩選出含有 P53 基因的肝癌細胞。脂質體在這個操作中的作用是_____。

（4）為證明P53 基因對肝癌細胞有抑制作用，需將兩種細胞接入多孔板中，并從次日開始檢測每孔的細胞總數，繪制成如圖所示的生長曲線。請分析兩條曲線分別是哪種細胞，曲線 1 是_____細胞，曲線 2 是_____細胞。

Answer 1

【答案】胰蛋白酶 細胞懸液 防止雜菌污染 利用 PCR 人工擴增目的基因 將 P53（目的）基因導入肝癌細胞 肝癌 轉入P53基因的肝癌

【解析】

本題考查動物細胞培養和應用。分析曲線圖：P53基因是正常細胞內重要的抑癌基因，所以導入P53基因的肝癌細胞數目會下降，即曲線2，而普通肝癌細胞能無限增殖，其數目不斷上升，即曲線1。

（1）動物細胞培養前需要用胰蛋白酶處理組織，使細胞分散成單個細胞。用培養液制成細胞懸液在培養箱中培養，在培養基中加入一定量的抗生素，其目的是防止其他細菌等雜菌的污染。

（2）若P53 基因兩側的一段核苷酸序列是已知的，則獲取P53 基因的方法通常是利用 PCR 人工擴增目的基因，在短時間內獲得大量的目的基因。
（3）脂質體在這個操作中的作用是作為運載體將P53（目的）基因導入肝癌細胞。
（4）P53基因是正常細胞內重要的抑癌基因，所導入P53基因的肝癌細胞數目下降，而普通肝癌細胞能無限增殖，其數目不斷上升，即曲線1是肝癌細胞，曲線2是轉入P53基因的肝癌細胞。