Question

（07天津卷）30．在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗基因（kan²）常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術流程。

請據圖回答：

（1）A過程需要的酶有                                               。

（2）B過程及其結果體現了質粒作為運載體必須具備的兩個條件是                ；                          。

（3）C過程的培養基因除含有必要營養物質、瓊脂和激素外，還必須加入          。

（4）如果利用DNA分子雜交原理對再生植物進行檢測，D過程應該用                                      作為探針。

（5）科學家發現轉基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規律。

①將轉基因植株與                  雜交，其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數量比為1∶1。

②若該轉基因植株自交，則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數量比為     。

③若將該轉基因植株的花藥在卡那霉素培養基上作離體培養，則獲得的再生植株群體中抗卡那霉素型植株占       ％。

Answer 1

答案：（1）限制性內切酶和DNA連接酶

（2）具有標記基因    能在宿主細胞中復制并穩定保存

（3）卡那霉素

（4）放射性同位素（或熒光分子）標記的抗蟲基因

（5）①非轉基因植株    ②3∶1    ③100

解析：本題考查的知識點較多：植物的組織培養、基因工程、細胞核遺傳等。作為基因工程操作的基本步驟：目的基因與質粒的重組，需要限制性內切酶和DNA連接酶才能完成，是否導入需要檢測，因為標記基因是卡那霉素抗性基因，所以在培養時除了在培養基中加入植物組織培養所需的營養物質、植物激素外，還要加入卡那霉素，以便于檢測重組質粒是否導入離體的棉花葉片組織細胞中了。題目中已明確告訴我們，轉基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規律，因此必為細胞核遺傳，由題意可知卡那霉素抗性基因為顯性基因，獲得的轉基因植株為雜合體植株，所以產生的花藥有兩種類型，一種是抗卡那霉素型，一種是卡那霉素敏感型，且數量相等，因此放在含有卡那霉素的培養基上離體培養，只有抗卡那霉素型才能形成單倍體植株，即100%為抗卡那霉素型植株。