Question

【題目】研究發現，利用抗體抑制腫瘤細胞表面的CD47蛋白的活性，可促進巨噬細胞吞噬腫瘤細胞。為制備抗CD47抗體，研究人員先利用基因工程方式制備CD47蛋白，圖為含CD47基因的外源DNA、質粒DNA的有關信息， EcoRI、BamHI、SalI、XhoI 均為限制酶，Kanr、Tcr分別為卡那霉素抗性基因、四環素抗性基因。

（1）為了形成合適的重組質粒，應該選用限制酶________切割外源DNA和質粒DNA。

A．EcoRI和XhoI B．BamHI和XhoI

C．EcoRI和SalI D．BamHI和SalI

（2）重組質粒導入大腸桿菌的成功率很低，需經篩選才能獲得導入成功的大腸桿菌，以下菌種為所需菌種的是________。

A．能在含卡那霉素的培養基上生長的菌種

B．能在含四環素的培養基上生長的菌種

C．能在含卡那霉素的培養基上生長、而不能在含四環素的培養基上生長的菌種

D．能在含四環素的培養基上生長、而不能在含卡那霉素的培養基上生長的菌種

下圖為制備抗CD47單克隆抗體的過程示意圖，A、B、C 表示細胞，①、②表示過程。

（3）給小鼠注射的抗原物質是________________，該物質被小鼠的免疫細胞識別，引起下列四項中的________過程，形成細胞A。

A．天然免疫 B．非特異性免疫 C．細胞免疫 D．體液免疫

（4）過程①表示________________過程，形成的細胞C稱為________________。過程②表示用________________技術獲得大量細胞。共同培養巨噬細胞和癌細胞，加入不同濃度的抗CD47抗體，測定巨噬細胞吞噬癌細胞的吞噬系數，得到了如圖所示的結果。

（5）結合圖及題干信息分析，以下描述正確的是________（多選）。

A．癌細胞表面的CD47蛋白能影響巨噬細胞吞噬癌細胞

B．較高濃度的抗CD47抗體有利于巨噬細胞吞噬癌細胞

C．使用抗CD47抗體治療癌癥需要嚴格控制抗體的濃度

D．抗CD47抗體能有效抑制癌細胞的增殖達到治療目的

Answer 1

【答案】B C CD47（CD47蛋白） D 細胞融合 雜交瘤細胞 細胞培養（體外培養） ABC

【解析】

限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。標記基因的作用是用于重組DNA的鑒定和選擇，以便把含有目的基因的受體細胞篩選出來。

（1）由圖可知，若用EcoRI和XhoI切割目的基因，則當用EcoRI和XhoI切割質粒時，質粒上的兩個標記基因均被破壞，故構建重組質粒不能選用EcoRI和XhoI，A錯誤；用BamHI和XhoI構建重組質粒時，既可以獲得完整的目的基因，又可以獲得含有卡那霉素抗性基因的重組質粒，B正確；由于目的基因內含有SalI酶切位點，所以不能用該酶切割目的基因，CD錯誤。

故選B。

（2）根據（1）中分析可知，重組質粒中的四環素抗性基因被破壞，而卡那霉素抗性基因未被破壞，所以重組質粒導入成功的大腸桿菌含有卡那霉素抗性基因，而不含四環素抗性基因，故該大腸桿菌能在含卡那霉素的培養基上生長、而不能在含四環素的培養基上生長，綜上分析，C正確，ABD錯誤。

故選C。

（3）實驗目的是制備抗CD47單克隆抗體，所以注射的抗原應為CD47蛋白，抗原進入小鼠體內，可引起小鼠的體液免疫，產生抗體。故D正確，ABC錯誤。

故選D。

（4）A細胞是從經過免疫的小鼠體內提取的漿細胞，B細胞為小鼠的骨髓瘤細胞，在誘融劑的作用下可融合為雜交瘤細胞，故①過程為細胞融合，形成的細胞C為雜交瘤細胞，形成的雜交瘤細胞還需要經過篩選獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，再將雜交瘤細胞經過動物細胞培養可獲得大量雜交瘤細胞，并能產生大量抗體。

（5）根據柱形圖可知，加入較高濃度的抗CD47抗體的實驗組與對照組相比巨噬細胞吞噬癌細胞的吞噬系數較高，說明癌細胞表面的CD47蛋白能影響巨噬細胞吞噬癌細胞以及較高濃度的抗CD47抗體有利于巨噬細胞吞噬癌細胞，AB正確；根據圖示可知，使用25ug.mL-1抗CD47抗體的實驗組與對照組相比巨噬細胞吞噬癌細胞的吞噬系數幾乎無差別，說明使用抗CD47抗體治療癌癥需要嚴格控制抗體的濃度，C正確；抗CD47抗體不能與癌細胞結合，針對癌細胞發揮作用的主要是效應T細胞，D錯誤。

故選ABC。