Question

【題目】下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線。圖中tetR表示四環素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindⅢ、SmaI直線所示為三種限制酶的酶切位點。據圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用___________________限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含________________的培養基上進行。

（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控序列是_______（填字母代號）。

A．啟動子 B．tetR C．復制原點 D．ampR

（3）過程①常用的操作方法是_________（填字母代號）。

A．農桿菌轉化法 B．大腸桿菌的鈣離子轉染法

C．顯微注射法 D．基因槍法

（4）過程②可采用的生物工程技術是_______________________。

（5）對早期胚胎進行切割，經過程②可獲得多個新個體。這利用了細胞的____________性。

（6）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用_______（填字母代號）技術。

A．核酸分子雜交 B．基因序列分析 C．抗原—抗體雜交 D．PCR

Answer 1

【答案】HindⅢ和BamHⅠ 氨芐青霉素 A C 胚胎移植技術 全能 C

【解析】

結合題意分析圖解：圖中質粒包括四環素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、啟動子、復制原點，以及兩個限制酶切點，并且兩個限制酶切點的位置均在四環素抗性基因上；目的基因上有三個限制酶切點，與質粒對照，共有的是BamHI、HindIII。
圖中①表示目的基因導入受體細胞，②表示通過胚胎移植的方式將早期胚胎移植到代孕母牛體內。

（1）由圖中信息可知，載體上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位點，目的基因上也有它們的酶切位點，應用此2種酶切。當人乳鐵蛋白基因和質粒連接成重組質粒后，tetR基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而ampR基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養基上進行。

（2）能讓目的基因開始表達的是啟動子，啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結合的DNA序列，是基因的一個組成部分，控制基因表達（轉錄）的起始時間和表達的程度。

（3）將目的基因導入到動物中常用顯微注射法。

（4）早期胚胎移入代孕牛的體內利用的是胚胎移植的技術。

（5）對早期胚胎進行切割，經過程胚胎移植過程可獲得多個新個體都發育成了個體，這體現了細胞全能性。

（6）一般檢測目的基因是否表達里用抗原-抗體雜交的方法。