【2010·浙江三校聯考】腫瘤是危害人類健康的重要疾病。某醫院病理室為確診一患者的腫瘤是否惡性,切取了其一小塊腫瘤組織進行培養。請回答下列有關問題:
(1)進行體外培養時,腫瘤組織必須先用____________________等處理成單個細胞。
(2)在培養中若要測量腫瘤細胞的數量,可以將待測樣品與等量的已知含量的紅細胞懸浮液混勻,涂布在載玻片上,經處理后觀察。請設計一張用于記錄觀察數據的記錄表,并推導出計算腫瘤細胞數目的公式。
①觀察數據記錄表:
②腫瘤細胞數的計算公式:____________________
(3)若在腫瘤細胞培養液中加入用3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸,短暫培養一段時間后,洗去3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸。使在該段時間內已處于DNA復制期不同階段的全部細胞中DNA被3H標記,而當時處于其它時期的細胞則不帶標記。不同時間取樣做細胞放射性自顯影,找出正處于有絲分裂的分裂期細胞,計算其中帶3H標記的細胞占有絲分裂細胞的百分數。得到下圖(圖1~圖4中橫軸為時間,縱軸為帶標記細胞占總細胞數的百分數):
①圖2中a點開始檢測到帶3H標記分裂期細胞,則o-a為 期,理由是: 。
②圖2中b點帶3H標記分裂期細胞數開始達到最大值,則a-b段表示 期,理由是: 。
③圖3中c點時,帶標記的細胞百分數開始下降,則a-c段表示哪些時期: 。
④此后,帶標記的分裂期細胞數逐漸減少,直到消失,到第二次出現帶有標記的細胞數時為圖表中e點,則一個完整的細胞周期為: 。
(4)某科研單位研制出一種新型藥物X,據說對此類腫瘤有較好的療效,能起到抑制腫瘤細胞分裂的作用。研究者設計了以下方案加以驗證,請將實驗步驟補充完整:將腫瘤細胞懸浮液分成等細胞數的A、B兩組。A組加入3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸,B組應加入 。相同條件下培養一段時間后,洗去培養液,把兩組細胞做相應的處理,分別檢測兩組細胞的放射性強度。如果出現的實驗現象為 ,則說明此藥物的療效好。
(1)胰蛋白酶
(2)①觀察數據記錄表:
(要求:視野3個以上;要有平均值、紅細胞數、腫瘤細胞數記載欄。以上項目不全不給分)
視野1 | 視野2 | 視野3 | 視野4 | 視野5 | 平均值 | |
紅細胞數 | ||||||
腫瘤細胞數 |
②腫瘤細胞數的計算公式為ab/c
(a:紅細胞懸浮液中的紅細胞數;b觀察到的視野中腫瘤細胞數的平均值;c:觀察到的視野中的紅細胞數的平均值)(無說明不給分)
(3)① G2 理由是:處于DNA復制最后階段的細胞最先出現標記。
② 分裂期 理由是:a點后,原處于DNA復制期最后階段的細胞完成有絲分裂。
③ S G2 分裂期(不全不給分)
④ a-e
(4)等量的3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸和藥物
A組細胞的放射性強度大于B組細胞
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