Question

【題目】回答下列(一)、(二)小題:

(一) 植物在突然遭遇寒冷環境時，體內脂氨酸的含量會增加，以度過寒冷的不良環境。因此冷害處理后的植物體內脂氨酸含量可以作為不同植物品種抗冷害性能的生理指標。農業部門的科學研究者為了找到一種抗寒能力較強的水稻，對多個水稻品種進行了冷害處理，測定體內的脂氨酸含量并進行比較，從而選擇出合適的品種。

(1)脂氨酸的含量可以通過讓其與相應試劑反應并顯色后，用 __________（填儀器名稱）測定其OD值來測定。測定OD值前，需要通過預實驗確定所需比色杯的_________，脂氨酸的含量相同時，比色杯的該指標越大所測得的OD值越_______�？梢酝ㄟ^OD值來確定脂氨酸含量的原理是_____________________。

(2)為了便于測定不同品種的水稻冷害處理后的脂氨酸含量，農業部門的科學研究者首先要將已知含量梯度的脂氨酸顯色反應后測定其OD值，繪制好___________。

(3)后來發現該品種水稻在寒冷環境中種植容易得一種怪病，科學研究者猜想是感染了某種抗寒能力比較強的細菌，為了篩選出這種細菌，需要配制______(A.LB選擇培養基 B.MS選擇培養基 C.LB全營養培養基 D.MS全營養培養基)，并需將接種后的培養基置于溫度設置為________(低溫\中溫\高溫)的恒溫培養箱中培養，然后對菌落中的細菌進行研究。

(二)科學家通過誘導黑鼠體細胞去分化獲得誘導性多功能干細胞(iPS)，繼而利用iPS細胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠。流程如下:

(1)要獲取iPS細胞，首先要進行黑鼠體細胞體外培養。為了方便實驗開展，可以對黑鼠組織用胰蛋白酶處理，其目的是消化____________，以獲得單個細胞的懸浮液。然后通過_____________得到純系的細胞群。

(2)對從灰鼠的____________部位獲取的2-細胞胚胎，進行體外培養至囊胚后，將其制成重組囊胚。重組囊胚移植到白鼠體內后其___________部分會發育形成胚胎的附屬結構或胚外結構，而________分化出成體動物的所有組織和器官。

(3)制備iPS細胞的方法是把0ct4等轉錄因子在基因導入小鼠成纖維細胞，有道其發生轉化，從而產生iPS細胞。在基因導入過程中，除了質粒外，還可以選用_____________為運載體。若將某目的基因導入的受體細胞為大腸桿菌時___(能/不能)選用T2噬菌體為運載體。

Answer 1

【答案】分光光度計/光電比色計/比色計 規格 越大 脂氨酸含量越高，顯色后顏色越深，OD值越大，呈正比例關系 標準曲線 C 低溫 組織中的膠原纖維(或再加上“細胞外的其他成分”) 克隆培養法 輸卵管(或子宮角) 滋養層 導入的iPS細胞群 病毒 不能

【解析】

1、LB培養基是通用的細菌培養基，MS培養基是植物組織培養中常用的培養基。

2、載體需具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩定保存；②具有一至多個限制酶切點；③具有標記基因。

(1)脂氨酸與相應試劑可發生顯色反應，可利用分光光度法測定其含量，用分光光度計測定其OD值來測定。測定OD值前，需要通過預實驗確定所需比色杯的規格。脂氨酸的含量相同時，比色杯的規格越大，所測得的OD值越大。一定范圍內，脂氨酸的含量越高，與相應試劑發生顯色反應后顏色越深，測定的OD值就越大，即脂氨酸含量與OD值成正比例關系。因此，可以通過OD值來確定脂氨酸含量。

(2)為了便于測定不同品種的水稻冷害處理后的脂氨酸含量，農業部門的科學研究者首先要將已知含量梯度的脂氨酸顯色反應后測定其OD值，繪制好標準曲線。

(3)后來發現該品種水稻在寒冷環境中種植容易得一種怪病，科學研究者猜想是感染了某種抗寒能力比較強的細菌，為了篩選出這種細菌，需要配制LB全營養培養基，并需將接種后的培養基置于溫度設置為低溫的恒溫培養箱中培養，然后對菌落中的細菌進行研究。

(二)(1)先用胰蛋白酶處理黑鼠組織，消化組織中的膠原纖維，以獲得單個細胞的懸浮液。然后通過克隆培養法得到純系的細胞群。

(2)由題圖可知，可從灰鼠的輸卵管中或子宮角直接獲取2-細胞胚胎，再進行體外培養至囊胚后，將其制成重組囊胚。重組囊胚移植到白鼠體內后其滋養層部分會發育形成胚胎的附屬結構或胚外結構，而內細胞團（即導入的iPS細胞群）分化出成體動物的所有組織和器官。

(3)基因工程中，在基因導入過程中，除了質粒外，還可以選用病毒（動物病毒、植物病毒和λ噬菌體）為運載體。T2噬菌體無法在大腸桿菌內穩定保存，因此將目的基因導入的受體細胞為大腸桿菌時不能選用T2噬菌體為運載體。