Question

【題目】人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大，通常從人血中提�。�但由于艾滋病病毒等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血液制品顧慮重重．如果應用基因工程將人的血清白蛋白基因轉入奶牛細胞中，那么利用牛的乳腺細胞生產血清白蛋白就成為可能．下圖表示利用乳腺生物反應器生產人血清白蛋白的過程，圖中Tetr表示四環素抗性基因，Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，五種限制酶的識別序列及切割位點如表所示，請回答以下問題：

限制酶	BamHⅠ	HaeⅢ	BclⅠ	Sau3AⅠ	NotⅠ
識別序列及切割位點

（1）構建基因表達載體時，需要將人血清白蛋白基因嵌入到之間，這樣人血清白蛋白基因就能在乳腺細胞中表達．
（2）要將人血清白蛋白基因插入質粒中，若只允許使用一種限制酶，那么應選擇的限制酶是 ．
（3）據圖分析，篩選含有重組質粒的受體細胞首先需要在含（填“四環素”或“氨芐青霉素”或“四環素或氨芐青霉素”）的培基上進行，原因是 ．
（4）若BamH I酶切的DNA末端與Bcl I酶切的DNA末端連接起來，連接部位的6個堿基對序列為 ， 對于該部位，這兩種酶（“都不能”或“只有一種能”）切開．
（5）為了獲得母奶牛，胚胎移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行 ． 若要檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用技術．

Answer 1

【答案】
（1）啟動子和終止子
（2）Sau3AⅠ
（3）氨芐青霉素；用限制酶切割后破壞了Tetr基因，但不會破壞Ampr基因，導入重組質粒的受體細胞（對氨芐青霉素具有抗性），能在含氨芐青霉素的培養基上生存下來
（4）；都不能
（5）性別鑒定；抗原﹣抗體雜交
【解析】解：（1）啟動子啟動轉錄過程，終止子終止轉錄過程，因此構建基因表達載體時，需要將人乳鐵蛋白基因嵌入到啟動子和終止子之間，這樣人乳鐵蛋白基因就能在乳腺細胞中表達．（2）根據表中五種酶的識別序列及切割位點可知，限制酶Sau3AI還可以切割限制酶BstⅠ和限制酶BamHⅠ的識別序列，因此要將人乳蛋白基因插入載體，在只允許用一種限制酶酶切載體和人乳鐵蛋白基因的情況下，應選擇限制酶Sau3AI．（3）據用限制酶Sau3AI切割后會破壞四環素抗性基因，但不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此倒入重組質粒的受體細胞可能在含有氨芐青霉素的培養基上生存下來．（4）根據表格中各種限制酶的識別序列和切割位點可知，若BamH I酶切的DNA末端與Bcl I酶切的DNA末端連接起來，連接部位的6個堿基對序列為 ，對于該部位，這兩種酶都不能切開．（5）為了獲得母奶牛，胚胎移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行性別鑒定．檢測目的基因是否表達產生相應的蛋白質可采用抗原﹣抗體雜交技術． 所以答案是：（1）啟動子和終止子 （2）Sau3AⅠ（3）氨芐青霉素 用限制酶切割后破壞了Tetr基因，但不會破壞Ampr基因，導入重組質粒的受體細胞（對氨芐青霉素具有抗性），能在含氨芐青霉素的培養基上生存下來（4） 都不能（5）性別鑒定 抗原﹣抗體雜交
【考點精析】認真審題，首先需要了解基因工程的原理及技術(基因工程的原理是利用DNA重組技術)．