Question

【題目】絞股藍葉片細胞中含有抗TMV(煙草花葉病毒)基因，對TMV具有抗感染能力，煙草是雙子葉植物，由于TMV的感染會導致大幅度減產，研究人員利用轉基因技術培育出了抗TMV的煙草，主要流程如圖所示：

（1）圖中①過程表示______________，通過這種方法構建的文庫屬于______________文庫。

（2）在過程③構建重組Ti質粒時，必須在目的基因的兩側添加______________和______________，應該含有的標記基因是______________基因。

（3）④過程常用的方法是______________。

（4）通過⑤獲得再生植株的理論基礎是______________，過程⑥可采取______________的方法，檢測植株是否合成了抗TMV蛋白。

Answer 1

【答案】逆轉錄 cDNA（ 部分基因） 啟動子 終止子 抗卡那霉素 農桿菌轉化法 植物細胞的全能性 抗原一抗體雜交

【解析】

圖中①表示以絞股藍葉片細胞中的RNA為模板，逆轉錄形成cDNA文庫的過程，②表示從cDNA文庫中獲取目的基因，③代表基因表達載體的構建，④表示把基因表達載體導入受體細胞，⑤目的基因的檢測與鑒定。

（1）根據分析可知，圖中①過程表示逆轉錄，通過這種方法構建的文庫屬于cDNA（部分基因）文庫。

（2）在基因表達載體中，目的基因的兩側應含有啟動子和終止子，以保證目的基因正常轉錄。根據⑤過程中培養基中含有卡那霉素，可判斷基因表達載體中抗卡那霉素基因為標記基因。

（3）將基因表達載體導入雙子葉植物，常選用農桿菌轉化法。

（4）植物細胞具有全能性，因此可通過⑤獲得再生植株，檢測植株是否合成了抗TMV蛋白，可采取抗原一抗體雜交的方法。

類型	步驟	檢測內容	方法	結果顯示
分 子 檢 測	導入 檢測	目的基因是否插入受體細胞染色體的DNA上	DNA分子雜交技術(DNA和DNA之間)	是否成功顯示出雜交帶
	表 達 檢 測	目的基因是否轉錄出mRNA	核酸分子雜交技術( DNA和mRNA之間)	同上
		目的基因是否翻譯出蛋白質	蛋白質分子雜交(抗原和抗體之間)	同上
個體生物學水平的鑒定		①確定是否具有抗性及抗性程度 ②基因工程產品與天然產品的活性是否相同	①抗蟲或抗病的接種實驗 ②基因工程產品與天然產品活性的比較	是否賦予了預期抗性或蛋白質活性