Question

【題目】回答下列關于遺傳信息的表達和生物工程問題：

圖（1）為限制酶EcoRⅠ的識別序列，圖（2）表示質粒，圖（3）表示目的基因及限制酶切點。請回答下列問題：

（1）圖（1）中限制酶EcoRⅠ的特點是______。

（2）為了使目的基因和質粒定向連接并且有利于受體細胞的篩選，提高重組效率，應該選擇的限制酶是______。

（3）如果大腸桿菌是受體細胞，則其體內應不含______基因，以利于篩選出含重組質粒的受體菌。按此要求，成功導入重組質粒的大腸桿菌具有的特點是______

A．能在含有青霉素的培養基上生長

B．能在含有四環素的培養基上生長

C．在含有青霉素的培養基上不能生長

D．在含有四環素的培養基上不能生長

（4）為了獲得含重組質粒的單個大腸桿菌的菌落，常用的接種方法是______。

（5）若該目的基因合成的是脂肪酶，在生產提純分泌型脂肪酶工程中，加入硫酸銨使酶與其他雜質分離，該過程屬于酶分離提純步驟中的______。

A．過濾酶

B．干燥酶

C．層析酶

D．沉淀酶

Answer 1

【答案】特異性識別和切割DNA PstⅠ、EcoRⅠ 抗四環素 B、C 平板劃線法或稀釋涂布平板法 D

【解析】

1、基因工程又叫DNA重組技術，是指按照人們的意愿，進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉基因等技術，賦予生物以新的遺傳特性，從而創造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品。

2、基因工程的工具：

（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（3）運載體：常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒。

（1）圖（1）中限制酶EcoRⅠ的特點是特異性識別和切割DNA（特異性識別GAAATTC和切割DNA中鳥嘌呤脫氧核苷酸和腺嘌呤脫氧核苷酸之間的鍵）。

（2）為了使目的基因和質粒定向連接并且有利于受體細胞的篩選，提高重組效率，又使四環素抗性基因不被破壞，應該選擇的限制酶是 PstⅠ、EcoRⅠ。

（3）如果大腸桿菌是受體細胞，則其體內應不含抗四環素基因，以利于篩選出含重組質粒的受體菌。按此要求，成功導入重組質粒的大腸桿菌具有的特點是能在含有四環素的培養基上生長但在含有青霉素的培養基上不能生長。

（4）為了獲得含重組質粒的單個大腸桿菌的菌落，常用的接種方法是平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（5）生產提純分泌型脂肪酶工程中，加入硫酸銨使酶與其他雜質分離，該過程屬于酶分離提純步驟中的沉淀酶