Question

【題目】為研究“某品牌酸奶中乳酸菌數量及其對抗生素耐藥性情況”某同學進行了如下實驗：

請分析回答下列問題：

（1）配制的細菌培養基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養成分外，還應加入適量的_______和瓊脂。在培養基各成分溶化與滅菌之間，要進行的操作是_______。

（2）接種微生物的方法有很多，圖中過程①②③所示的方法為_______________。用該方法統計樣本菌落數時，同時需要做A、B、C三個培養皿，原因是_________________。用該方法統計樣本菌落數后，所得數據需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數量（單位：個/ml），這里的n=_____________（4或5或6）。經正確操作培養后，3個平板上的菌落數分別為150、158和157。據此可得出每毫升樣品中的活菌數_______（填“至多”或“至少”）為________個。

（3）請完善“檢測乳酸菌對青霉素、四環素耐藥性”的實驗操作步驟：

步驟1：分別取______________________________加入三組無菌培養皿中，再加入滅菌并冷卻到50°C左右的培養基，立即混勻，靜置凝固成平板。

步驟2：向三組培養基中分別接種待檢測的乳酸菌菌種。

步驟3：將接種后的三組培養基和一個________都置于適宜溫度等條件下培養一定時間，觀察比較培養基中菌落生長情況。

Answer 1

【答案】維生素 調pH 稀釋涂布平板法 分別計數3次取平均值，使實驗結果更加準確可靠 6 至少 1.55×108 等量的且適量的青霉素、四環素、無菌水 未接種的培養基

【解析】

分析圖解可知，圖示過程為微生物分離與純化過程中的稀釋涂布平板法，即將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

（1）配制的細菌培養基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養成分外，還應加入適量的維生素和瓊脂。在培養基各成分溶化與滅菌之間，要先調pH。

（2）接種微生物的方法有很多，圖1中過程①②③所示的方法為稀釋涂布平板法，用該方法統計樣本菌落數時，同時需要做A、B、C三個培養皿，分別計數3次，取平均值，使實驗結果更加準確可靠。分析圖解可知，圖中酸奶樣品總共稀釋105倍，并且稀釋涂布平板時只取了0.1ml，因此這里的n=6。3個平板上的菌落數分別為：150、158和157，據此可得出每升樣品中的活菌數至少為（150+158+157）÷3÷0.1×105=1.55×108個。

（3）步驟1：根據等量原則，應該分別取等量的青霉素、四環素和無菌水加入三組無菌培養皿中。步驟3：根據對照原則，應該將接種后的三組培養基和一個未接種的培養基都置于適宜溫度等條件下培養若干天作為對照試驗。