Question

【題目】微衛星DNA是廣泛分布于真核生物基因組中的簡單重復序列。由于重復單位和重復次數在個體間表現出一定的遺傳性和差異性，因此微衛星DNA可以作為分子標記，并有著廣泛應用。

（1）可以用標記的__________________為探針，與基因組文庫進行雜交篩選，然后再經多個步驟獲取微衛星DNA。

（2）擴增微衛星DNA序列A7I0的PCR反應體系中含緩沖液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物及耐熱的DNA聚合酶。其中dNTP的作用是_____________________________； PCR技術護增目的基因的前提是_________________________，以便根據這一序列合成引物，所以引物應選用下圖中的_________（填圖中標號）。PCR的基本反應步驟為__________________________，其產物以_______________形式擴增。

（3）根據“微衛星DNA”的特點判斷，應用這種標記可進行的研究有________（填字母）。

①人類親子鑒定 ②調查某地大熊貓種群數量

③誘導基因突變 ④冠狀病毒遺傳物質測序

A．①② B．②③ C．③④ D．①④

Answer 1

【答案】微衛星DNA（重復序列） 合成DNA的原料、提供能量 有一段已知目的基因的核苷酸序列 Ⅰ和Ⅳ DNA解鏈-引物結合到互補鏈-互補鏈的合成（變性、復性/退火、延伸） 約為2n（指數） A

【解析】

PCR一般要經歷三十多次循環，每次循環可分為變性、復性、延伸三步。在循環之前，常需要進行一次預變性，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。

PCR過程為:

變性，當溫度上升到90 ℃以上時，氫鍵斷裂，雙鏈DNA解旋為單鏈。

復性，當溫度降低到50℃左右是，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。

延伸，溫度上升到72 ℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸，在DNA聚合酶的作用下，根據堿基互補配對原則合成新的DNA鏈。

（1）由于微衛星DNA是真核生物基因組中的簡單重復序列，而且在個體間表現出一定的遺傳性和差異性，因此可以用標記的微衛星DNA（重復序列）為探針，與基因組文庫進行雜交篩選，然后再經多個步驟獲取微衛星DNA。

（2）PCR反應體系中含緩沖液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物及耐熱的DNA聚合酶。其中緩沖液模擬的是細胞中DNA復制的環境，dNTP是合成DNA的原料、并能提供能量，引物為子鏈的合成提供起始點，DNA聚合酶催化DNA的復制過程； PCR技術擴增目的基因的首要條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據這一序列合成引物，引物能夠與模板DNA鏈進行堿基互補配對，而后在DNA聚合酶的作用下，單個的脫氧核苷酸連接到引物的3’端，所以引物應選用下圖中的Ⅰ和Ⅳ（填圖中標號）。PCR的步驟包括DNA解鏈（高溫變性）--引物結合到互補鏈（低溫復性）-互補鏈的合成（中溫延伸），其產物大約以2n（指數）形式擴增。

（3）由于微衛星DNA在個體間表現出一定的遺傳性和差異性”因此應用這種標記可進行的研究有：

①由于微衛星DNA在個體間表現出一定的遺傳性和差異性，因此可以用于人類親子鑒定 ，① 正確

②可利用微衛星DNA的特性進行某地大熊貓種群數量的調查，②正確；

③誘導基因突變的因素有物理因素、化學因素和生物因素，與微衛星DNA的特性聯系不起來，③錯誤；

④冠狀病毒遺傳物質是RNA，其測序過程與微衛星DNA無關，④錯誤；即①②正確。

故選A。