Question

【題目】生物柴油是一種可再生清潔能源，其應用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗�？茖W家發現，在微生物M產生的脂肪酶的作用下，植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油（如下圖）。

（1）欲分離篩選出能分泌脂肪酶的細菌，應配制_____碳源的培養基，這種培養基從功能上看屬于____培養基。

（2）在微生物培養過程中，滅菌與消毒的主要區別是滅菌能夠殺死物體內外______。常用______法對玻璃器皿進行滅菌。

（3）經過稀釋，在平板上接入0．1mL稀釋液并涂布，經適當時間培養后，在平板上計數菌落，據此可計算出每毫升培養液中的活菌數。這種計數方法得到的結果一般比實際值偏小，原因可能有______________________________。

（4）經上述實驗發現稀釋倍數為101、102、103、104、105、106得到的結果分別為難以計數、難以計數、難以計數、159、17、2，為保證結果準確，一般選擇_____稀釋倍數的平板進行統計。

（5）為降低生物柴油生產成本，可利用__________技術使脂肪酶能夠重復使用。

Answer 1

【答案】以脂肪為唯一 選擇 所有的微生物的芽孢和孢子 干熱滅菌 有的菌落是由2個以上的細菌形成的、涂布器上還殘留少量細菌 104 固定化酶

【解析】

1、微生物的營養物質主要有碳源、氮源、水和無機鹽等，篩選菌株時需要用選擇培養基；實驗室中篩選微生物的原理是人為提供有利于目的菌生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物生長。

2、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

（1）欲分離篩選出能分泌脂肪酶的細菌，應配制以脂肪為唯一碳源的培養基；由于只要能分解脂肪的微生物能在這種培養基上生存，因此從功能上看，其屬于選擇培養基。

（2）在微生物培養過程中，滅菌和消毒的主要區別是滅菌能夠殺死物體內外所有的微生物的芽孢和孢子，玻璃器皿常采用的滅菌方法為干熱滅菌。

（3）采用稀釋涂布平板法得到的結果一般比實際值偏小，原因可能是有的菌落是由2個以上的細菌形成的、涂布器上還殘留少量細菌。

（4）根據題干中數據可知，稀釋倍數為104時，培養基中菌落能通過肉眼進行計數，且數目在30-300之間，因此為保證結果準確，一般選擇104稀釋倍數的平板進行統計。

（5）為降低生物柴油生產成本，可利用固定化酶技術使脂肪酶能夠重復使用。