Question

6．已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾�。甋ARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體．某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作．其簡要的操作流程如下：

（1）實驗步驟①所代表的反應過程是逆轉錄．
（2）步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用限制性內切酶和DNA連接酶，后者的作用是將限制性內切酶切割的目的基因和載體連接起來．
（3）如果省略步驟②而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能復制，也不能以其為模板合成S基因的mRNA（或轉錄）．
（4）為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用大腸桿菌中表達的S蛋白與SARS康復病人血清進行抗原--抗體特異性反應實驗，從而得出結論．
（5）步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列相同（相同、不同），根本原因是表達蛋白質所用的基因相同．

Answer 1

分析 根據逆轉錄的概念分析（1）．根據限制性核酸內切酶和DNA連接酶的作用分析（2）．根據S基因在大腸桿菌中不能進行復制，也不能轉錄分析（3）．根據抗原一抗體特異性反應分析（4）．根據基因控制蛋白質的合成分析（5）．

解答 解：（1）實驗步驟①RNA控制DNA合成，該過程是逆轉錄．
（2）步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B，必須使用同種限制性核酸內切酶切割目的基因和載體，形成相同的粘性末端，再用DNA連接酶，形成重組DNA．
（3）如果省略步驟③基因表達載體的構建，而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能進行復制，也不能進行以其為模板合成S基因的mRNA（或轉錄）．
（4）步驟④檢測所表達的S蛋白的特征，可用大腸桿菌中表達的S蛋白與SARS康復病人血清進行抗原-抗體特異性反應實驗，如果能夠特異性的結合，說明表達成功．
（5）步驟④和⑥的結果相比，原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表達蛋白質所用的目的基因相同．
故答案為：
（1）逆轉錄　
（2）DNA連接  　   目的基因          載體
（3）復制　以其為模板合成S基因的mRNA（或轉錄）
（4）大腸桿菌中表達的S蛋白    　SARS康復病人血清　
（5）相同      　表達蛋白質所用的基因相同

點評 本題考查基因工程的步驟等相關知識，意在考查學生獲取處理信息的能力，分析和解決問題的能力，有一定的綜合性．