Question

【題目】毛角蛋白Ⅱ型中間絲(KIFⅡ)基因與絨山頭羊的羊絨質量密切相關。獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程如圖。

(1)獲取外源基因用到的工具酶是__________，為了提高實驗成功率，通常利用______技術獲得大量標記的外源基因。

(2)在過程②中，用____________處理將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞。由于人們對動物細胞所需營養物質還沒有完全搞清楚，因此在培養細胞時需在培養基中加入一定量的____________，在培養過程中，應將培養瓶置于________培養。

(3)圖中重組細胞的細胞核來自____________的細胞，若要獲得多只相同的轉基因山羊，可對圖中早期胚胎進行________后進行胚胎移植。以上技術是在________(填“體內”或“體外”)完成的。

(4)下列有關基因工程的敘述正確的是________。

A．切割目的基因和載體DNA時為了獲得相同的粘性末端，必須用相同的限制性核酸內切酶。

B．用基因探針可以檢測目的基因是否表達

C．限制性核酸內切酶的作用只是用來提取目的基因

D．重組表達載體上含有RNA聚合酶的識別結合位點

Answer 1

【答案】 限制性核酸內切酶 RCR 胰蛋白酶 動物血清 CO2培養箱 導入目的基因 胚胎分割 體外 D

【解析】試題分析：熟記并理解基因工程的基本操作程序、動物細胞培養、核移植技術和胚胎工程等相關的基礎知識并形成清晰的知識網絡。在此基礎上結合題意，從題圖中提取有效信息，準確定位圖中數字所示生理過程，進而對相關問題進行作答。

(1) 獲取外源基因（目的基因）用到的工具酶是限制性核酸內切酶。RCR技術可以擴增目的基因，因此欲獲得大量標記的外源基因，可利用RCR技術。

(2) 過程②借助的是動物細胞培養技術，用胰蛋白酶處理，可將羊胎兒皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞。在培養動物細胞時需在培養基中加入一定量的動物血清，且將培養瓶置于CO2培養箱中培養，以保證細胞對營養的需求和維持培養液的pH穩定。

(3) 圖中重組細胞是由去核的卵母細胞與導入目的基因的細胞的細胞核重組而成。若要獲得多只相同的轉基因山羊，可對圖中早期胚胎進行胚胎分割后進行胚胎移植。以上技術均是在體外完成。

(4)切割目的基因和載體DNA時為了獲得相同的粘性末端，既可以用相同的限制性核酸內切酶，也可用不同的限制性核酸內切酶，A項錯誤；用基因探針可以檢測目的基因是否導入受體細胞和檢測目的基因是否轉錄出mRNA，但不能檢測目的基因是否翻譯出蛋白質，而基因的表達包括轉錄和翻譯，B項錯誤；限制性核酸內切酶的作用是用來提取目的基因和切割運載體，C項錯誤；重組表達載體的組成包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因等，其中啟動子位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，D項正確。