Question

【題目】請根據所學微生物的實驗室培養和應用知識，回答下列問題：

（1）在微生物培養過程中，實驗室常用的滅菌方法有______、______和高壓蒸汽滅菌。

（2）滅菌結束后，待培養基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰旁將培養基倒入滅過菌的培養皿中，這個操作稱為______。此過程還需要將錐形瓶的瓶口迅速通過火焰，目的是______。

（3）如圖為連續劃線法示意圖，在圖中______（填圖中序號）區域更易獲得單菌落，判斷依據是______。

（4）稀釋涂布平板法常用于統計樣品中的活菌數，先將菌液進行一系列的______，然后取少量菌液涂布在培養基表面，這種方法得到的菌落數比活菌的實際數目低，原因是______。

Answer 1

【答案】灼燒滅菌 干熱滅菌 倒平板 防止瓶口微生物污染培養基 ③ 每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，最后一次劃線結束時更容易獲得單菌落 梯度稀釋 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上只能形成一個菌落

【解析】

（1）培養基的營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。培養基的分類：①按物理性質分，分為液體培養基和固體培養基，固體培養基中含有凝固劑，一般是瓊脂。②按化學成分分，分為天然培養基和合成培養。兩者的區別是天然培養基成分不確定，合成培養基成分的含量是確定的。③按用途分，分為選擇培養基和鑒別培養基。選擇培養基主要是培養、分離特定的微生物，培養酵母菌可在培養基中加入青霉素；鑒別培養基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍培養基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌。

（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。

培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。

（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落。

（1）常用的滅菌方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。

（2）倒平板操作是指滅菌結束后，待培養基冷卻至 50℃左右時，在酒精燈火焰旁將培養基倒入滅過菌的培養皿中。為避免瓶口微生物污染培養基此過程還需要將錐形瓶的瓶口迅速通過火焰。

（3）據圖分析可知，圖示為平板劃線法得到的平板，依據是每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，最后一次劃線結束時更容易獲得單菌落，圖中③區域更易獲得單菌落。

（4）用稀釋涂布平板法接種之前，需要將菌液進行梯度稀釋。當兩個或多個細胞連在一起時，平板上只能形成一個菌落，故由此得到的菌落數比活菌的實際數目低