Question

科學家將魚抗凍蛋白基因轉入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環境中生長。質粒上有Pst I、Sma I、Hind Ⅲ、Alu I等四種限制酶切割位點，下圖是轉基因抗凍番茄培育過程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①～④是轉基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關結構或細胞。請據圖回答：

（1）在構建基因表達載體時，為了避免目的基因和載體在酶切后產生的末端發生任意連接，在此實例中，應該選用限制酶_____________分別對________________進行切割，切割后產生的DNA片段分別為_____和_________種。

（2）培養基中的氨芐青霉素會抑制番茄愈傷組織細胞的生長，要利用該培養基篩選含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞，應使基因表達載體I中含有__________作為標記基因。

（3）通常采用__________________技術，在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應的蛋白質。

（4）利用組織培養技術特含魚的抗凍蛋白基因的番茄組織細胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養過程中番茄組織細胞的______________________________過程。

Answer 1