Question

【題目】若要利用某目的基因（見圖甲）和質粒載體（見圖乙）構建重組 DNA（見圖丙），限制性核酸內切酶的酶切位點分別是 BglⅡ（A↓GATCT）、EcoRⅠ（G↓AATTC）和 Sau3AⅠ（↓GATC）。下列分析合理的是（ ）

A.用 EcoRⅠ切割目的基因和質粒載體

B.用 BglⅡ和 EcoRⅠ切割目的基因和質粒載體

C.用 BglⅡ和 Sau3AⅠ切割目的基因和質粒載體

D.用 EcoRⅠ和 Sau3AⅠ切割目的基因和質粒載體

Answer 1

【答案】D

【解析】

分析題圖：用EcoRI切割目的基因和P1噬菌體載體，產生相同的黏性末端，用DNA連接酶連接時可能會發生反向連接；用BglI和EcoRI切割目的基因切割目的基因會產生兩種DNA片段，一種含有目的基因，一種不含目的基因；用Bg1I和Sau3AI切割目的基因和P1噬菌體載體，也能產生相同的黏性未端，可能會發生反向連接；只有用EcoRI和Sau3AI切割目的基因和P1噬菌體載體，產生不同的黏性未端，防止發生方向連接，這樣目的基因插入運載體后，RNA聚合酶的移動方向肯定與圖丙相同。

A、用EcoRI切割目的基因和P1噬菌體載體，產生相同的黏性未端，用DNA連接酶連接時可能會發生反向連接，A錯誤；

B、用BglI和EcoRI切割目的基因切割目的基因會產生兩種DNA片段，一種含有目的基因，一種不含目的基因，且有目的基因的片段與運載體結合時容易發生反向連接，B錯誤；

C、用BglI和Sau3AI切割目的基因和P1噬菌體載體，也能產生相同的黏性末端，可能會發生反向連接，C錯誤；

D、只有用EcoRI和Sau3AI切割目的基因和P1噬菌體載體，產生不同的黏性未端，防止發生反向連接，這樣目的基因插入運載體后，RNA聚合酶的移動方向肯定與圖丙相同，D正確。

故選D。