Question

【題目】農桿菌Ti質粒上的T-DNA可以轉移并隨機插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環，并以此環為模板進行PCR，擴增岀T-DNA插入位置兩側的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法不正確的是（ ）

注：子鏈從引物的3/端開始延伸

A.PCR擴增依據的是DNA分子雙鏈復制的原理

B.進行PCR擴增需要的酶有解旋酶和熱穩定DNA聚合酶

C.利用圖中的引物②、③組合可擴增岀兩側的未知序列

D.通過與受體細胞的基因組序列比對，可確定T-DNA的插入位置

Answer 1

【答案】BC

【解析】

PCR技術：

1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

2、原理：DNA復制。

3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）。

5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

A、PCR擴增依據的是DNA分子雙鏈復制的原理，A正確；

B、進行PCR擴增需要熱穩定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶），但不需要解旋酶， B錯誤；

C、DNA的兩條鏈反向平行，子鏈從引物的3/端開始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴增岀兩側的未知序列，C錯誤；

D、通過與受體細胞的基因組序列比對，即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選BC。