Question

【題目】某研究性學習小組了解到泡菜中的乳酸菌除了在發酵中產生乳酸，還可以降解亞硝酸鹽，該小組利用泡菜液進行了相關的研究。請回答下列問題：

（1）測定泡菜中亞硝酸鹽的含量可以用_________法。

（2）小組成員用改良的MRS固體培養基分離乳酸菌，該培養基成分如下：

蛋白胨	牛肉膏	酵母膏	葡萄糖	CaCO3	瓊脂	蒸餾水	其他成分略
10g	10g	10g	20g	20g	20g	1000ml

①該培養基因含碳酸鈣而不透明，乳酸菌產生的乳酸能溶解培養基中的碳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈，該培養基屬于__________（填“選擇”成“鑒別”）培養基。

②小組成員將泡菜液進行梯度稀釋后，取0．1ml加入到50℃左右的培養基中搖勻，待凝固后，再在其上加蓋一層透明的固體培養基。在50℃左右操作的原因是_____________________，加蓋一層透明的固體培養基的目的是______________________________。

③在恒溫培養箱中培養72h后，挑取溶鈣圈較大的菌落，用平板劃線法進行進一步純化。若下圖甲是接種培養后的菌落分布圖，對應的平板劃線操作示意圖為___________圖。

④乳酸菌在-20℃的冷凍箱中長期保存時，需要加入一定量的__________________。

Answer 1

【答案】比色 鑒別 此時培養基為液態且不燙手 隔絕空氣（氧氣），確保無氧環境 丙 甘油

【解析】

1、培養基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養基	培養基中加入某種化學成分	根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養基	加入某種試劑或化學藥品	依據微生物產生的某種代謝產物與培養基中特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計	鑒別和區分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養基可以鑒別大腸桿菌

2、運用平板劃線法接種微生物時，在進行第二次以及其后的劃線操作時'要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。
3、菌種保存

	臨時保存法	甘油管藏法
適用對象	頻繁使用的菌種	長期保存的菌種
培養及類型	固體斜面培養基	液體培養基
溫度	4℃	-20℃
方法	菌落長成后于冰箱中保存，每3～6個月將菌種從舊的培養基轉移到新鮮培養基上	將培養的菌液與等體積滅菌后的甘油混合均勻后于冷凍箱內保存
缺點	菌種易被污染或產生變異	\\

（1）測定泡菜中亞硝酸鹽的含量可以用比色法。

（2）①該培養基因含碳酸鈣而不透明，乳酸菌產生的乳酸能溶解培養基中的碳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈，該培養基屬于鑒別培養基。
②小組成員將泡菜液進行梯度稀釋后，取0.1ml加入到50℃左右的培養基中搖勻，待凝固后，再在其上加蓋一層固體培養基，在50℃左右操作的原因是此時培養基為液態且不燙手，加蓋一層固體培養基的目的是隔絕空氣（氧氣），確保無氧環境。
③使用平板劃線法時，在進行第二次以及其后的劃線操作時要從上一次劃線的末端開始劃線，如圖丙所示。
④長期保存菌種應該用甘油管藏法，因此乳酸菌在-20℃的冷凍箱中長期保存時，需要加入一定量的甘油。