Question

【題目】2016年，日本科學家發現一種細菌能夠消化塑料（PET）這種細菌通過分泌PET降解酶（PETase）來完成塑料分解。下圖是從細菌中獲取PET降解酶基因的流程示意圖，結合所學知識及相關信息回答下列問題：

（1）從細菌中提取DNA構建基因組文庫和從基因組文庫中分離得到目的基因I，兩個過程都要用到的酶是_____________。

（2）B過程需要用到__________酶，用該方法形成的cDNA_________（選填“可以”、“不可以”）進行物種間的基因交流。

（3）從兩種文庫中獲取的目的基因都可以利用__________技術大量擴增，該技術的前提，是要有一段___________序列，以便根據這一序列合成引物。

（4）由于大腸桿菌容易培養，科學家想把該基因導入大腸桿菌細胞中，在導入大腸桿菌細胞前，通常采用__________處理大腸桿菌細胞，使細胞處于一種_____________的生理狀態。為檢測目的基因是否成功在大腸桿菌細胞中表達，可采用______________技術。

Answer 1

【答案】限制酶 逆轉錄 可以 PCR 已知目的基因的核苷酸 能吸收周圍環境中DNA分子 抗原—抗體雜交

【解析】

基因工程的操作步驟包括目的基因的獲取、構建基因表達載體、把目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測和鑒定。

（1）從細菌中提取DNA構建基因組文庫需要用限制酶切割DNA，從基因組文庫中分離得到目的基因I也需要從受體菌中提取DNA并用限制酶切割。

（2）B過程是逆轉錄，需要用到逆轉錄酶，cDNA可以進行物種間的基因交流。

（3）目的基因都可以利用PCR技術大量擴增，該技術的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據這一序列合成引物。

（4）在導人大腸桿菌細胞前，通常采用處理大腸桿菌細胞，使細胞處于一種能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態，即感受態。檢測目的基因是否成功表達，即檢測蛋白質是否形成，可采用抗原—抗體雜交技術。