Question

【題目】下圖是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程，下表記錄了在適宜條件下培養一段時間后的實驗結果，回答下列相關問題：

(1)如圖，取10g土壤樣品加入90mL蒸餾水，若將土壤樣品稀釋到107倍還需從上次稀釋液取1mL加入9mL蒸餾水逐級稀釋________次。

(2)表中各平板上均接種稀釋土壤樣品溶液0.1mL，該接種方法是________________________，為了保證結果準確，應選擇上述稀釋度為________倍的平板菌落數作為統計結果，計算出每克土壤樣品中的細菌數量為____________個。

(3)圖中鑒別培養基需添加____________作指示劑，產脲酶細菌在該培養基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成____________色。

(4)若某研究性學習小組配制圖示選擇培養基時，培養基配方如下：1.4gKH2PO4、2.1gNa2HPO4、0.2gMgSO4·7H2O、1.0g蛋白胨、10.0g葡萄糖、1.0g尿素、15.0g瓊脂，根據培養基的成分判斷，該培養基________(填“能”或“不能”)達到選擇培養的作用？原因是________________________________________________________________。

Answer 1

【答案】6 稀釋涂布平板法 106 7.3×108 酚紅 紅 不能 培養基中含有蛋白胨，尿素不是唯一的氮源，不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物

【解析】

1、鑒定分解尿素的細菌：細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強。在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑培養細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠產生脲酶，并分解尿素。

2、微生物接種到固體培養基常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法接種可以形成單菌落，所以常用來進行微生物的計數。

（1）取10g土壤樣品加入90mL蒸餾水，該步驟稀釋了10倍，以后是從上次稀釋液取1mL加入9mL蒸餾水中，每稀釋一次即稀釋了10倍，所以若將土壤樣品稀釋到107倍還需從上次稀釋液取1mL加入9mL蒸餾水逐級稀釋6次。
（2）根據圖中培養基上的菌落分布情況可知，圖中的接種方法為稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法進行計數時，應選擇平板上30-300的菌落數進行計數，因此應選擇上述稀釋度為106倍的平板菌落數作為統計結果，計算出每克土壤樣品中的細菌數=（78+67+74）÷3÷0.1×106=7.3×108。
（3）脲酶能夠催化尿素分解為氨，氨會使培養基中堿性增強，PH升高，使酚紅指示劑變紅色。所以圖中鑒別培養基需添加酚紅作指示劑，產脲酶細菌在該培養基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成紅色。

（4）上述培養基含蛋白胨，其中含有氮元素，尿素不是該培養基的唯一氮源，使不能合成脲酶的微生物也能在此培養基上生長，故不能選出只分解尿素為氮源的微生物。