Question

【題目】高濃度的銨鹽對海水養殖中的對蝦有一定的毒害作用，是制約其大規模養殖的環境因素之一，具有高降解能力的硝化細菌可有效凈化水體中銨鹽，降低對蝦的死亡率，科研人員擬從當地對蝦養殖池塘中篩選出對銨鹽降解率高且穩定的硝化細菌菌株，操作流程如下圖1，請回答下列問題：

（1）為了篩選出硝化細菌，在配制選擇培養基時，需要以______為唯一氮源。

（2）該硝化細菌在半固體培養基試管中培養時，其生長特征符合圖2中①所示，由此推測，利用錐形瓶培養該硝化細菌時需要振蕩培養的目的是增加硝化細菌與______、______的充分接觸。

（3）純化菌種時，除圖1中所示的接種方法外，還可采用______法。兩種方法的原理相似，都是先對菌懸液進行______，使聚集的菌種分散開，最后在平板上形成單個菌落。

（4）在利用平板計數時，需每隔一個“時間間隔”統計一次菌落數，最后選取穩定時的菌落數作為記錄結果，這樣可以避免因培養時間不足造成______，導致統計結果偏小。為使獲得的實驗數據準確，還應對每種候選菌株設置______。

（5）將篩選出的等量的三種候選菌甲、乙、丙，分別接入銨鹽濃度為40mg·L-1的模擬養殖污水中，在適宜條件下培養48h，結果如圖3。據圖分析，應選擇候選菌______（填甲、乙或丙）作為菌種進行后續培養。

Answer 1

【答案】銨鹽 營養物質 溶解氧（順序可顛倒） 稀釋涂布平板法 稀釋 遺漏菌落的數目 （至少3個）平行組 乙

【解析】

硝化細菌是自養型生物，能利用化學能將CO2還原為有機物。單菌落分離法包含劃線分離法和涂布分離法，常用于分離獲得單菌落。劃線分離法是用接種環以無菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，并逐步分散開來。稀釋平板計數是根據微生物在固體培養基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養特征設計的計數方法，即一個菌落代表一個單細胞。

（1）為了篩選出對銨鹽降解率高且穩定的硝化細菌菌株，在配制選擇培養基時，需要以銨鹽為唯一氮源。

（2）該硝化細菌在半固體培養基試管中培養時，其生長特征符合圖2中①所示，由此推測，利用錐形瓶培養該硝化細菌時需要振蕩培養的目的是增加硝化細菌與營養物質、溶解氧的充分接觸，促進硝化細菌的繁殖。

（3）圖1中所示的接種方法為劃線分離法，還可采用稀釋涂布平板法獲得單菌落，純化菌種。兩種方法的原理相似，都是先對菌懸液進行稀釋，使聚集的菌種分散開，最后在平板上形成單個菌落。

（4）菌落生長需要時間，在利用平板計數時，需每隔一個“時間間隔”統計一次菌落數，最后選取穩定時的菌落數作為記錄結果，這樣可以避免因培養時間不足造成遺漏菌落的數目，導致統計結果偏小。為使獲得的實驗數據準確，還應對每種候選菌株設置（至少3個）平行組。

（5）據圖分析，乙的銨鹽濃度最低，說明乙菌種對銨鹽的降解效果最好，應選擇候選菌乙作為菌種進行后續培養。