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【題目】為了探究植物細胞間是否存在橫向基因交流,科學家培育兩種轉基因葡萄,再通過嫁接手段進行相關試驗,其過程如下。

1)構建兩種表達載體,其主要特征見下表:

表達載體

組成

抗生素杭性基因

目的基因

啟動子

Ti質粒類型

壯觀霉素抗性基因S+

綠色熒光蛋白基因gfp

葉綠體專一性啟動子

P1

卡那霉素抗性基因K+

黃色熒光蛋白基因yfp

非葉綠體專一性啟動子

P2

外源基因插入受體細胞位置

接穗葉綠體DNA

砧木細胞核DNA

①在篩選抗生素抗性基因時,須進行敏感性試驗,以選擇葡萄外植體_________(敏感/不敏感)的某種抗生素,并依據試驗結果確定抗生素在選擇培養基中的工作濃度。

②在構建上述兩種表達載體時,可以互換部分組件,但一定不能互換的是_____________

2)轉化、鑒定后獲得兩類轉基因葡萄植株。根據表中的表達載體組成推斷:

①目的基因導入葡萄細胞的方法是__________法。

②若在加入卡那霉素的培養基中獲得幼苗,說明基因K+插入了P2_________中。

3)兩類轉化葡萄植株的嫁接并篩選嫁接及抗生素篩選過程見下圖。僅有嫁接區組織細胞在雙抗生素的培養基中發育成幼苗,其原因是該幼苗獲得了______________特性。

4)嫁接區再生植株目的基因表達產物的鑒定及其研究意義

用嫁接區獲得的再生植株進行雜交,并對其F1及其親本的幼苗做鑒定,結果見下表。

試驗編號

試驗處理

CK

M

N

J

gfp蛋白鑒定

-

+

-

+

+

-

-

-

+

-

yfp蛋白鑒定

-

-

+

+

-

-

+

+

3+1

注:CK未轉基因植株;M葉綠體轉化植株;N細胞核轉化植株;J嫁接區再生植株+檢出,-未檢出;3+1-表示檢出與未栓出的植株比。

①試驗①②③④和⑨的結果表明,J/span>植株的每一個體細胞均含有_________基因。

A.gfp B.yfp C.gfpyfp

②綜上①~⑨試驗結果,可以得出結論______________________________。

③通過該試驗探究,你認為下列敘述正確的是____________________。

A.細胞間的橫向基因交流可以為生物進化提供原材料

B.基因工程可看作是一種人為的細胞間基因橫向轉移過程

C.細胞間的橫向基因交流實質是基因突變

D.轉移至染色體或葉綠體DNA的外源基因均遵循孟德爾遺傳定律

【答案】敏感 啟動子與目的基因 農桿菌轉化 細胞核DNA 兩類轉化葡萄植株的遺傳 C 植物細胞間發生了橫向的基因交流 AB

【解析】

根據表格分析,甲表達載體的抗生素杭性基因(標記基因)是壯觀霉素抗性基因S+,目的基因是綠色熒光蛋白基因gfp,啟動子是葉綠體專一性啟動子,Ti質粒為P1;乙表達載體的抗生素杭性基因(標記基因)是卡那霉素抗性基因K+, 目的基因是黃色熒光蛋白基因yfp,啟動子是非葉綠體專一性啟動子,Ti質粒為P2;兩種外源基因插入受體細胞位置分別是接穗葉綠體DNA、砧木細胞核DNA。

1)①在篩選抗生素抗性基因時,須進行敏感性試驗,以選擇葡萄外植體敏感的某種抗生素,再以這種抗生素抗性基因作為標記基因,并依據試驗結果確定抗生素在選擇培養基中的工作濃度。

②基因表達載體的組成成分包括目的基因、啟動子、標記基因、終止子等,在構建上述兩種表達載體時,可以互換部分組件,但一定不能互換的是啟動子與目的基因。

2)①將目的基因導入葡萄細胞一般用農桿菌轉化法。

②若在加入卡那霉素的培養基中獲得幼苗,結合表格分析可知基因K+插入了P2的細胞核DNA中。

(3)根據題意分析,僅有嫁接區組織細胞在雙抗生素的培養基中發育成幼苗,說明該幼苗獲得了兩類轉化葡萄植株的遺傳特性。

①根據題意分析,gfp蛋白細胞質基因表達的產物,yfp蛋白是細胞核基因表達的產物,細胞質基因表現為母系遺傳,而細胞核基因遵循基因的分離定律,結合實驗中的①②③④和⑨分析可知,J植株的每一個體細胞均含有gfpyfp基因,故選C。

②綜上①~⑨試驗結果,說明用嫁接區獲得的再生植株的葉綠體DNA中獲得了綠色熒光蛋白基因gfp,細胞核DNA中獲得了黃色熒光蛋白基因yfp,即植物細胞間發生了橫向的基因交流。

③A、細胞間的橫向基因交流的實質是基因重組,可以為生物進化提供原材料,A正確;

B、基因工程可看作是一種人為的細胞間基因橫向轉移過程,B正確;

C、細胞間的橫向基因交流實質是基因重組,C錯誤;

D、轉移至染色體的外源基因均遵循孟德爾遺傳定律,但是轉移至葉綠體DNA的外源基因不遵循,D錯誤。

故選AB。

練習冊系列答案
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