Question

【題目】回答下列(一)、(二)小題：

(一)下面是有關食醋制作的實驗，請回答：

(1)若以大米為原料經三步發酵可以制作食醋：

第一步：大米經蒸熟、冷卻后加入淀粉酶，將原料中的淀粉分解成________(填中間產物)，然后進一步水解成葡萄糖，這一過程可用________(填淀粉指示劑)來檢測，因為該試劑遇淀粉呈藍色，遇上述中間產物呈紅色。

第二步：用酵母菌將葡萄糖轉化成乙醇，這一發酵過程中，玻璃發酵瓶不應完全密閉的主要原因是_____________________________________________________。

第三步：用________菌將乙醇轉化成乙酸，這一過程是否需要氧氣：________。

(2)若以葡萄為原料，將葡萄榨成汁后裝入相應的發酵瓶中，在溫度等適宜的條件下進行發酵，如下圖所示。

則圖中實驗操作的錯誤之處是____________________________________________________。

(3)借助顯微鏡對酵母菌進行計數，下列會影響計數準確性的操作是________。

A．壓在方格線上的細胞只計左線和上線上的酵母菌數

B．用滴管取1滴培養液到血細胞計數板的方格區，蓋上蓋玻片，進行計數

C．如果酵母菌有芽體，因沒有分離成兩個子體，要以一個計數

D．方格內酵母菌總數量應不少于300個

(二)人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

請回答：

(1)htPA基因與質粒通常用同種__________________切割，再通過__________酶連接構建重組質粒。

(2)為獲取更多的卵(母)細胞，通常對供體母羊進行____________處理。卵(母)細胞在體外培養成熟，再與經過____________處理的精子完成受精作用。體外受精卵還需經過____________培養，然后再移植，代孕產仔。最后檢測篩選，下列檢測結果中，作為培育成功標志的是________。

A．體細胞中檢測到htPA基因

B．體細胞中檢測到htPA基因的mRNA

C．羊奶中檢測到htPA

D．羊奶中檢測到蛋白質含量明顯增加

(3)若快速繁殖轉htPA基因羊，下列胚胎工程技術中沒有直接涉及的是________。

A．胚胎體外培養 B．胚胎移植

C．胚胎分割 D．胚胎干細胞培養

Answer 1

【答案】 糊精 KII2 發酵過程會產生大量的二氧化碳，使瓶內壓力升高，若完全密閉，可能引起爆裂 醋化醋桿 是 未夾住發酵瓶的進氣管 C 限制性核酸內切酶 DNA連接 超數排卵 獲能 (早期)胚胎體外 C D

【解析】試題分析：本題結合轉htPA基因母羊的培育過程圖，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關細節，能結合所學的知識準確答題。

（一）(1)第一步：大米經蒸熟、冷卻后加入淀粉酶，將原料中的淀粉分解成中間產物糊精，然后進一步分解成葡萄糖，這一過程可用KII2 來檢測，因為該試劑遇淀粉呈藍色，遇上述中間產物呈紅色。第二步：用酵母菌將葡萄糖轉化成乙醇，這一發酵過程中，該過程中除了產生酒精，還會產生大量的CO2，使瓶內壓力升高，使瓶內壓力升高而可能引起爆裂，因此操作玻璃發酵瓶不應完全密閉。

第三步：用醋酸菌將乙醇轉化成乙酸，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此該過程需要消耗氧氣。

（2）果酒發酵時需要無氧環境，因此甲圖中的錯誤是未夾住發酵瓶的進氣管。

（3）用血細胞計數板進行計數時，壓在方格邊上的酵母菌，只能計數相鄰兩邊及其頂角的個體數，否則會產生誤差，A錯誤；對酵母菌計數時，應該先震蕩均勻，滴于蓋玻片邊緣，讓培養液自行滲入，多余培養液用濾紙吸去，而不能直接將培養液滴到血細胞計數板的方格區，蓋上蓋玻片，進行計數，B錯誤；用血球計數板計數酵母菌數量時酵母菌的芽體也作為個體計數，會使實驗所得到數值比實際數值偏大，因此酵母菌有芽體，沒有分離成兩個子體，要以一個計數，C正確；方格內酵母菌總數量大于300個，數量太多，細胞疊加在一起，會是讀數帶來誤差，D錯誤。

（二）（1）目的基因和運載體需用同種限制性核酸內切酶（或同種限制酶）切割，產生相同的粘性末端，通過DNA連接酶連接，以構建重組表達載體。

（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數排卵．采集的精子需要經過獲能（處理），才具備受精能力。體外受精卵還需經過胚胎體外培養，然后再移植，代孕產仔。基因表達成功時可獲得目的基因的產物，既在轉htPA基因母羊的羊乳中檢測到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達，故選C。

(3) 由于胚胎干細胞具有發育的全能性，因此可以利用胚胎干細胞快速培養繁殖轉htPA基因羊，故選D。