Question

【題目】圖1為某種質粒簡圖，圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性核酸內切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、Hind Ⅲ的酶切位點。下列有關敘述錯誤的是

A. 如果用EcoRⅠ對外源DNA和質粒進行酶切，將多個含有目的基因的DNA片段與多個質粒的酶切產物用DNA連接酶進行連接后，兩兩連接所形成的產物有三種

B. 如果將一個外源DNA分子和一個質粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切點有1個

C. 為了防止質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化，酶切時應使用BamHⅠ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理

D. 一個圖1所示的質粒分子經EcoRⅠ切割后，含有2個游離的磷酸基團

Answer 1

【答案】B

【解析】A．如果用EcoRⅠ對外源DNA和質粒進行酶切，將多個含有目的基因的DNA片段與多個質粒的酶切產物用DNA連接酶進行連接后，兩兩連接所形成的產物有三種，A正確；B．如果將一個外源DNA分子和一個質粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切點有2個，B錯誤；C．為了防止質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化，酶切時應使用BamHⅠ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理，C正確；D．質粒切割前是雙鏈環狀DNA分子，所有磷酸基團參與形成磷酸二酯鍵，故不含游離的磷酸基團．從圖1可以看出，質粒上只含有一個EcoRⅠ的切點，因此被改酶切割后，質粒變為線性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個游離的磷酸基團，因此圖1所示的質粒分子切割后含有兩個游離的磷酸基團，D正確。故選B。