Question

【題目】下圖為利用人成纖維細胞(具分裂能力、能在 HAT 培養基上存活)和小鼠骨髓瘤細胞(具分裂能力、不能在 HAT 培養基上存活)進行人類基因定位的操作示意圖，請回答相關問題：

（1）圖示方法是動物細胞融合技術的應用，該技術的基礎是________技術。

（2）操作所用的成纖維細胞應傳代____代以內，誘導融合時需要加入的化學促融劑是____。

（3）人、鼠細胞先經過細胞融合形成多核細胞，再經過一次____分裂，形成單核細胞。

（4）HAT培養基起________培養作用，培養時溫度應為________℃ ，操作中加入烏本苷的目的是____________。

Answer 1

【答案】動物細胞培養 10 PEG 有絲 選擇 36．5±0．5 除去成纖維細胞（或選出雜交瘤細胞）

【解析】

1、分析圖示：該技術屬于動物細胞融合。2、動物細胞工程常用的技術手段有：動物細胞培養、動物細胞核移植、動物細胞融合、生產單克隆抗體等，其中動物細胞培養技術是其他動物工程技術的基礎。原代培養細胞傳至10代左右就不容易傳下去，細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡。3、動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞；誘導動物細胞融合的方法有電激、聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒等。

（1）據圖分析，該技術屬于動物細胞融合技術；該技術的基礎是動物細胞培養技術。
（2）成纖維細胞應傳代10代以內；遺傳物質沒有發生改變的細胞株，誘導融合時需要加入的促融劑是PEG（化學誘導）。
（3）人、鼠細胞先經過細胞膜融合形成多核細胞，經過一次有絲分裂，形成單核細胞。
（4）據題干信息，人成纖維細胞能在HAT培養基上存活，而小鼠骨髓瘤細胞不能在HAT培養基上存活，則HAT培養基起選擇培養作用；培養時溫度應為36.5±0.5℃（與人的體溫相接近）；篩選出人成纖維細胞和成纖維細胞融合的雜交細胞，操作中加入烏本苷的目的是除去成纖維細胞，篩選出雜交細胞。