Question

13．某同學欲從土壤中分離出能分解尿素的細菌并對該菌進行計數，下列實驗操作中不正確的是（　　）

• A． 將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋
• B． 在無氮培養基中加入酚紅指示劑可用來鑒定分解尿素的細菌
• C． 可將未接種的培養基在相同條件下培養作為對照
• D． 同一濃度的土壤稀釋液應至少涂布三個平板

Answer 1

分析 1、從土壤中分離出能分解尿素的細菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株．
2、尿素分解菌產生的脲酶能夠將尿素分解為氨使酚紅指示劑呈紅色，用加入酚紅指示劑的培養基可篩選出分解尿素的細菌．
3、稀釋涂布法：是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，在適宜條件下培養．在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落．能夠測定樣品中活菌數的方法是：稀釋涂布平板法．

解答 解：A、為防止土壤浸出液濃度過高，難以獲得單菌落，要將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋，A正確；
B、在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑可篩選出分解尿素的細菌，B錯誤；
C、可以將未接種的培養基在相同條件下培養作為對照，以判斷培養基滅菌是否徹底，C正確；
D、同一濃度的土壤稀釋液應至少涂布三個平板，防止偶然因素對實驗結果的影響，D正確．
故選：B．

點評 本題主要考查微生物的培養和分離、尿素分解菌的篩選與分離，意在強化對實驗過程的理解，提高學生的實驗技能．