Question

【題目】回答下列有關生物技術實踐的問題：

（1）某公司研發的一種培養大腸桿菌的培養基配方為：蛋白胨10克、葡萄糖5克、蔗糖5 克、KH2PO42克、顯色劑（伊紅美藍）0．2g、瓊脂12克，將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1000mL。根據用途劃分，該培養基屬于________________培養基，若要分離能分解尿素的細菌，需對培養基作出的兩項調整是___________________________。

（2）對同一濃度的菌液，分別用血細胞計數板計數和涂布分離法計數， 若不存在實驗誤操作，則前者的數量______（填“多于”、“等于”或“小于”） 后者，其原因是_______。

（3）某科研工作者用特殊的化學物質將酶包裹，遇水后包裹層很快溶解，釋放出來的酶迅速發揮催化作用。請說明這是否運用了酶的固定化技術及其理由：_____________。

Answer 1

【答案】鑒別 將蛋白胨換成尿素；瓊脂換成瓊脂糖 多于 前者將死菌、活菌一起計數，后者只計活菌；后者存在多個菌形成一個菌落的情況 未運用 因為酶未固定在不溶于水的載體上，也不能重復利用

【解析】

1、微生物培養基按用途分為選擇培養基和鑒別培養基，按物理性質分為液體培養基和固體培養基。

2、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

3、固定化酶技術的應用：①固定化酶：固定化酶是指用物理學或化學的方法將酶與固相載體結合在一起形成的仍具有酶活性的酶復合物。在催化反應中，它以固相狀態作用于底物，反應完成后，容易與水溶性反應物和產物分離，可被反復使用。②制備固定化酶：目前，制備固定化酶的方法主要有吸附法、交聯法、包埋法等。吸附法的顯著特點是工藝簡便且條件溫和，在生產實踐中應用廣泛；交聯法是利用多功能試劑進行酶與載體之間的交聯，在酶和多功能試劑之間形成共價鍵，從而得到三維的交聯網架結構；包埋法是將酶包埋在能固化的載體中。

（1）根據題意分析，該培養基中含有顯色劑（伊紅-美藍），可用于鑒別大腸桿菌，應該屬于鑒別培養基。分離能分解尿素的細菌時應該以尿素為唯一氮源，因此若要分離能分解尿素的細菌，需要將培養基中的蛋白胨換成尿素，瓊脂換成瓊脂糖。

（2）對同一濃度的菌液，分別用血細胞計數板計數和涂布分離法計數，由于前者將死菌、活菌一起計數，而后者存在多個產脲酶菌形成一個菌落的情況且只計數活菌，所以前者的數量多于后者。

（3）根據題意分析，由于只是用特殊的化學物質將脲酶包裹，其中的酶并未固定在不溶于水的載體上，也不能重復利用，所以沒有利用酶的固定化技術。