Question

15．請回答下列有關胚胎工程和基因工程方面的問題：
（1）目前，科學家通過細胞核移植實驗，培育出多種哺乳動物新類型．在哺乳動物的核移植實驗中，一般通過電脈沖（或電刺激） （2）（3）（4）（物理方法）將受體細胞激活，使其進行細胞分裂并發育，當胚胎發育到桑椹胚或囊胚階段時，將胚胎植入另一雌性（代孕）動物體內．
（2）在“試管�！钡呐嘤�過程中，要使精子和卵母細胞在體外成功結合，需要對精子進行獲能處理．另外，培養的卵母細胞需要發育至減數第二次分裂中期，該時期在顯微鏡下可觀察到次級卵母細胞和第一極體．
（3）將已免疫的小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，獲得能分泌特定抗體的雜交瘤細胞的過程中至少要進行兩次篩選，一次是通過選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，另一次是通過專一抗體檢測篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細胞．
（4）若要使獲得的轉基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則所構建的基因表達載體必須包括：目的基因和啟動子、人干擾素基因、終止子、標記基因和復制原點等．目前常用的措施是將該基因表達載體導入牛的受精卵（填“受精卵”或“乳腺細胞”）．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、受精前的準備階段
（1）準備階段1-精子獲能．剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動物生殖道發生相應的生理變化后，才能獲得受精能力．
（2）準備階段2-卵子的準備，動物排出的可能是初級卵母細胞也可能是次級卵母細胞，都要在輸卵管內進一步成熟，達到減數第二次分裂中期時，才具備與精子受精的能力．

解答 解：（1）在哺乳動物的核移植實驗中，一般通過電脈沖（或電刺激）將受體細胞激活，使其進行細胞分裂并發育；當胚胎發育到桑葚胚或囊胚階段時，將胚胎植入另一雌性（代孕）動物體內．
（2）體外受精時，需要對精子進行獲能處理．另外，培養的卵母細胞需要發育至MⅡ中期（減數分裂第二次分裂中期）．
（3）將已免疫的小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，獲得能分泌特定抗體的雜交瘤細胞的過程中至少要進行兩次篩選，一次是通過選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，另一次是通過專一抗體檢測篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細胞．
（4）基因表達載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動子、人干擾素基因（或目的基因）、終止子、標記基因和復制原點等．培育轉基因動物時，常以受精卵為受體細胞，且將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
故答案為：
（1）電脈沖（或電刺激）    桑椹胚或囊胚
（2）獲能    減數第二次分裂中期
（3）選擇     專一抗體檢測
（4）目的基因和啟動子    受精卵

點評 本題考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記核移植的具體過程；胚胎移植的基本程序；識記基因工程的具體操作步驟，掌握各步驟中的細節，能結合所學的知識準確答題．